SELENITE NƯỚC DÙNG: NỀN TẢNG, CHUẨN BỊ VÀ SỬ DỤNG - SINH HỌC - 2025

Các selenite là một môi trường nuôi cấy lỏng có chọn lọc. Nó được thiết kế bởi Leifson để làm giàu các mẫu nơi nghi ngờ sự hiện diện của vi khuẩn gây bệnh đường ruột thuộc giống Salmonella.

Phương tiện này tuân thủ các yêu cầu của Hiệp hội Y tế Công cộng Hoa Kỳ (APHA), và do đó được chấp nhận để điều tra sự hiện diện của Salmonella trong các mẫu phân, nước tiểu, thức ăn lỏng hoặc rắn, nước, v.v.

Selenite nước dùng. Nguồn: Ảnh do tác giả ThS. Marielsa gil

Thành phần hóa học của nó hỗ trợ sự phục hồi của những vi sinh vật này và đến lượt nó lại ức chế sự phát triển của những vi sinh vật khác. Nó chủ yếu gây độc cho hầu hết các vi khuẩn thuộc Họ Enterobacteriaceae. Tuy nhiên, nó cũng cho phép phục hồi các chủng Shigella và không ức chế sự phát triển của Pseudomonas và Proteus.

Nó bao gồm natri hydro selente khan, natri photphat khan, pepton và lactoza. Ngoài ra còn có một biến thể mà cystine được thêm vào, do đó có tên là nước dùng selenite-cystine.

Hiện nay, việc sử dụng môi trường selenite-cystine được ưu tiên hơn, vì tỷ lệ thu hồi Salmonella cao hơn thu được, tương đương với tỷ lệ quan sát được với môi trường chọn lọc khác cho cùng mục đích, chẳng hạn như môi trường natri tetrathionate.

Nền tảng

Các pepton có trong nước dùng đóng vai trò là chất dinh dưỡng cho sự phát triển thích hợp của vi sinh vật. Các chủng vi khuẩn Salmonella sử dụng pepton làm nguồn cung cấp nitơ, vitamin và axit amin.

Lactose là carbohydrate có thể lên men, trong khi natri selenite là chất ức chế ngăn chặn sự phát triển của vi khuẩn Gram dương và hầu hết các vi khuẩn có trong hệ vi khuẩn đường ruột, đặc biệt là những vi khuẩn thuộc họ Enterobacteriaceae. Natri photphat là chất đệm ổn định độ pH của môi trường.

Trong trường hợp biến thể canh selenite có chứa L-cystine, hợp chất bổ sung này là một chất khử làm giảm thiểu độc tính của selen, làm tăng khả năng thu hồi Salmonella.

Sự chuẩn bị

-Selenite nước dùng

Nếu bạn có các thành phần của hỗn hợp, bạn có thể cân:

4 g natri hiđro selente khan.

10 g natri photphat khan.

5 g pepton.

4 gam đường lactose.

Hòa tan các hợp chất trong 1 lít nước cất vô trùng. Có thể đun nóng nhẹ cho tan hoàn toàn.

Một số phòng thí nghiệm phơi môi trường trong 10 phút trong hơi nước lưu thông để khử trùng, vì không nên sử dụng nồi hấp. Nếu môi trường đã được tiệt trùng, có thể bảo quản trong tủ lạnh cho đến khi sử dụng.

Nó cũng có thể được chuẩn bị không vô trùng và cho trực tiếp 10 đến 15 ml vào các ống nghiệm vô trùng.

Trong trường hợp này, nên để nó nghỉ ngơi và sử dụng ngay. Vì môi trường không vô trùng nên không thể bảo quản trong tủ lạnh để sử dụng sau này.

- Chuẩn bị môi trường thương mại

Nếu có sẵn môi trường thương mại, cân 23 g môi trường đã khử nước và hòa tan trong một lít nước cất vô trùng. Đun nóng một thời gian ngắn để kết thúc quá trình hòa tan. Không hấp tiệt trùng. Dùng 10 hoặc 15 ml vô trùng trong các ống nghiệm vô trùng.

PH cuối cùng của môi trường phải là 7,0 ± 0,2.

Cần lưu ý rằng màu của môi trường khử nước là màu be và chế phẩm có màu hổ phách nhạt và mờ.

Biến thể nước dùng Selenite-cystine

Nó chứa các hợp chất tương tự như nước dùng selen, nhưng 10 mg cystine được thêm vào. Phần còn lại của quy trình hoàn toàn giống như mô tả ở trên.

Các ứng dụng

Môi trường này đặc biệt được sử dụng trong các nghiên cứu dịch tễ học, trong trường hợp bệnh chưa ở giai đoạn cấp tính, bệnh nhân không có triệu chứng hoặc người lành mang trùng.

Việc phân lập chi Salmonella nói chung là khó, vì chúng thường chỉ là những mẫu có khả năng lây nhiễm kém. Với số lượng nhỏ, nó dễ bị chồng chéo bởi sự phát triển của các chi vi khuẩn khác được tìm thấy với số lượng lớn hơn.

Mặt khác, nguyên liệu thô mà thực phẩm chế biến được tạo ra thường tiếp xúc với nhiệt, quá trình khử nước, sử dụng chất khử trùng, bức xạ và chất bảo quản, trong số những người khác.

Do đó, Salmonellas có trong nguyên liệu thô bị ngược đãi bằng cách đưa sản phẩm vào các quy trình công nghiệp nói trên. Tương tự như vậy, trong trường hợp mẫu lâm sàng như phân, các chủng vi khuẩn có thể yếu nếu chúng đến từ những bệnh nhân đã được điều trị bằng kháng sinh.

Do đó, bất kỳ mẫu nào nghi ngờ có sự hiện diện của Salmonella nên được làm giàu trước trong môi trường lactose, và sau đó được làm giàu trong canh trường selen để tối ưu hóa khả năng thu hồi trong môi trường chọn lọc, chẳng hạn như thạch SS, thạch xylose, lysine deoxycholate (XLD ), thạch Hektoen trong ruột (HE) và thạch xanh lục sáng, trong số những loại khác.

Gieo

Đối với mẫu phân, lấy 1 g mẫu và huyền phù trong ống với 10 đến 15 ml nước dùng selen. Nếu phân lỏng, lấy 1 ml và hòa trong nước dùng. Đối với gạc trực tràng, xả chất liệu gạc vào nước dùng.

Trong mẫu thực phẩm rắn lấy 1 gr và huyền phù trong nước dùng selen.

Trong thức ăn lỏng, trộn các phần bằng nhau với nước dùng selen ở nồng độ gấp đôi.

Đối với mẫu nước tiểu, tiến hành ly tâm, loại bỏ phần nổi phía trên, lấy hết phần lắng và huyền phù trong nước dùng selen.

Nước dùng được ủ ở 37 ° C trong 24 giờ ủ. Sự phát triển của vi khuẩn được chứng minh bằng độ đục. Một ống bổ sung cho mỗi mẫu cũng có thể được bao gồm để ủ ở 42 ° C. Sau đó, cấy môi trường rắn chọn lọc từ canh trường selen.

QA

Để kiểm soát độ vô trùng, nước dùng selen từ mỗi lô chưa cấy được ủ ở 37 ° C trong 24 giờ. Dự kiến ​​rằng môi trường không bị đục hoặc thay đổi màu sắc.

Các chủng đã biết có thể được sử dụng để kiểm soát hoạt động thích hợp của môi trường, chẳng hạn như:

Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 và Proteus mirabilis ATCC 43071.

Kết quả mong đợi là:

• Đối với ba chủng vi khuẩn đầu tiên, sự tăng trưởng phải đạt yêu cầu.
• Đối với Escherichia coli ức chế một phần.
• Đối với Proteus tăng trưởng vừa phải.

Hạn chế

Môi trường canh tác Selenite độc ​​với da người, do đó cần tránh tiếp xúc trực tiếp.

Người giới thiệu

1. Flores-Abuxapqui J, Puc-Franco M, Heredia-Navarrete M, Vivas-Rosel M, Franco-Monsreal J. So sánh giữa môi trường nuôi cấy natri selenit và natri tetrathionat, cả hai đều được ủ ở 37 ° C và 42 ° C cho phân lập Salmonella spp từ phân của người mang mầm bệnh. Rev Biomed năm 2003; 14 (4): 215-220
2. Phòng thí nghiệm Britannia. Nước dùng Selenito. 2015. Có sẵn tại: britanialab.com
3. Phòng thí nghiệm Neogen. Selenite nước dùng. Có tại: Foodsafety.neogen.com
4. González -Pedraza J, Pereira -Sanandres N, Soto -Varela Z, Hernández -Aguirre E, Villarreal- Camacho J. Phân lập vi sinh đối với Salmonella spp. và các công cụ phân tử để phát hiện ra nó. Sức khỏe, Barranquilla 2014; 30 (1): 73-94. Có sẵn từ: http://www.scielo.org.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Chẩn đoán vi sinh Bailey & Scott. 12 ed. Biên tập Panamericana SA Argentina.