MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY CHỌN LỌC: NỀN, RẮN VÀ LỎNG - SINH HỌC

Môi trường nuôi cấy chọn lọc là nước dùng và thạch dùng để phân lập một nhóm vi sinh vật xác định, đồng thời ức chế sự phát triển của những nhóm khác. Chúng rất lý tưởng để gieo các mẫu vi khuẩn, cho phép thu hồi mầm bệnh từ hệ vi sinh vật đi kèm.

Có rất nhiều phương tiện chọn lọc, giữa chất rắn và chất lỏng. Một số được dùng để phân lập vi khuẩn Gram dương, chẳng hạn như Staphylococcus dương tính coagulase, Lactobacillus, Bifidobacteria, v.v.

Môi trường nuôi cấy chọn lọc. Nguồn: Air1404

Một số khác để phục hồi các mầm bệnh Gram âm, chẳng hạn như các loài thuộc các giống Salmonella, Shigella, Vibrio, Bordetella, Brucella, Pseudomonas, trong số những loài khác.

Ngoài ra, chúng cũng có lợi cho sự phát triển của nấm và men, chẳng hạn như các loài Candida, Histoplasma, Cryptococcus, dermatophytes, trong số những loài khác.

Cần lưu ý rằng một số môi trường làm giàu không chọn lọc có thể trở nên chọn lọc khi bổ sung kháng sinh. Tương tự như vậy, một số môi trường nuôi cấy có thể chọn lọc và phân biệt cùng một lúc.

Mặt khác, có những môi trường nuôi cấy lỏng chọn lọc; một số có thể dùng làm môi trường làm giàu, tạo điều kiện cho sự trầm trọng của một nhóm vi khuẩn chọn lọc, trong khi ngăn chặn nhóm vi khuẩn khác.

Môi trường nuôi cấy chọn lọc được sử dụng rộng rãi trong các phòng thí nghiệm vi sinh để phân tích các loại mẫu khác nhau; cũng như để phân lập nhiều loại vi sinh vật quan tâm trong lâm sàng, công nghiệp, môi trường và thực phẩm.

Nền tảng

Môi trường nuôi cấy chọn lọc dựa trên việc chứa các chất dinh dưỡng có lợi cho sự phát triển của một loại vi khuẩn hoặc nấm cụ thể hoặc của một nhóm nhất định trong số này, đồng thời chúng phải chứa các chất ức chế không cho phép sự phát triển của các vi sinh vật không mong muốn khác.

Trong số các chất dinh dưỡng chúng có thể chứa là: tuyến tụy tiêu hóa casein, chiết xuất nấm men, polypepton, trong số những chất khác.

Các chất ức chế bao gồm: kháng sinh, muối mật, xanh lục sáng, tím pha lê, fuchsin cơ bản, eosin, xanh methylen, natri deoxycholat, natri sulfit, sorbitan monoleat, amoni xitrat, cetrimide, liti clorua, kali tellurit , xanh malachite, trong số những loại khác.

Đôi khi các phương tiện truyền thông có thể vừa chọn lọc vừa khác biệt. Tương tự như vậy, mức độ chọn lọc thay đổi từ môi trường này sang môi trường khác.

Một số có tính chọn lọc cao, được đặc trưng bởi có các điều kiện cực kỳ thù địch đối với hầu hết các vi sinh vật và chỉ có một số loài nhỏ có thể chịu được các điều kiện hiện có trong môi trường và do đó phát triển tốt. Ví dụ, thạch TCBS và thạch MRS, trong số những loại khác.

Trong khi những loại khác có tính chọn lọc vừa phải, tức là những loại ức chế một nhóm vi sinh vật cụ thể, chẳng hạn như vi khuẩn Gram dương. Mặt khác, chúng thích sự phát triển của nhiều loại vi khuẩn Gram âm; ví dụ, thạch Mac Conkey.

Cuối cùng, có những môi trường nuôi cấy có sức chọn lọc thấp, nghĩa là chúng là những môi trường cho phép sự phát triển của nhiều loại vi khuẩn giữa Gram dương và Gram âm, cũng như một số loại nấm men, trong khi chỉ ức chế một nhóm nhỏ vi sinh vật. Ví dụ: EMB agar.

Phương tiện văn hóa rắn có chọn lọc

Thạch Baird-Parker

Phương tiện được thiết kế để phát hiện tụ cầu dương tính với coagulase (Staphylococcus aureus). Chứa các chất ức chế liti clorua và kali Tellurit.

BCYE Agar hoặc Yeast Charcoal Extract Buffered Agar

Nó là một môi trường nuôi cấy được làm giàu cao, đặc biệt để phân lập các loài Legionella và Nocardia. Môi trường này trở nên chọn lọc với việc bổ sung các chất kháng khuẩn như polymyxin B, vancomycin và anisomycin.

Thạch BHI với kháng sinh

Thạch BHI ban đầu là một môi trường được làm giàu, nhưng nếu thêm chloramphenicol và cycloheximide, nó là lý tưởng để phân lập chọn lọc các loại nấm quan tâm trong lâm sàng.

Thạch BIGGY

Môi trường chọn lọc và khác biệt để phân lập các loài Candida. Nó chứa amoni xitrat, bismuth và natri sulfit, hoạt động như chất ức chế sự phát triển của vi khuẩn.

Bordet Gengou Agar

Môi trường nuôi cấy phong phú và chọn lọc, đặc biệt để phân lập B ordetella pertussis và Bordetella parapertussis. Nó chứa cephalexin để ức chế hệ thực vật đi kèm.

Campy agar với máu

Môi trường được sử dụng để phân lập chi Campylobacter. Chứa cefoperazon, vancomycin và amphotericin B để ức chế sự phát triển của vi khuẩn Gram âm, Gram dương và nấm.

Campylobacter Butzler Agar

Môi trường đặc biệt để phân lập các loài thuộc chi Campylobacter. Nó được bổ sung với máu ngựa, trong số các chất dinh dưỡng khác. Nó cũng chứa các chất ức chế khác nhau, chẳng hạn như novobiocin, colistin, cefazolin, bacitracin và cycloheximide.

Campylobacter Skirrow Agar

Môi trường chọn lọc để phân lập các loài Campylobacter. Chứa máu ngựa và các chất dinh dưỡng khác. Là chất ức chế, nó chứa vancomycin, polymyxin B và trimethoprim.

Thạch CCF hoặc thạch fructose, cycloserine, cefoxitin

Như tên gọi của nó, nó chứa cycloserine và cefoxitin như các chất ức chế và được sử dụng để phân lập Clostridium diffcile trong các mẫu phân, trong số các mẫu ruột khác.

Cetrimide agar

Môi trường chọn lọc, được thiết kế để phân lập Pseudomonas aeruginosa, có lợi cho việc sản xuất các chất màu. Cetrimide (cetyl trimethyl amonium bromide) là chất ức chế sự phát triển của vi khuẩn không phải P. aeruginosa.

Thạch sô cô la với isovitalex và vancomycin

Phương tiện này ban đầu rất giàu. Việc bổ sung vancomycin rất hữu ích để phân lập chọn lọc các chủng Neisseria gonorrhoeae và N. meningitidis.

CIN agar hoặc cefsulodine agar, irgasan, novobiocin

Nó là một môi trường nuôi cấy chọn lọc vừa phải để phân lập các loài Yersinia.

Thạch CNA (colistin, axit nalidixic)

Đây là môi trường chọn lọc đặc biệt để phân lập các vi khuẩn Gram dương như Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus và nấm men, nhưng nó ức chế sự phát triển của các vi khuẩn Gram âm như Pseudomonas và các loài thuộc họ Enterobacteriaceae.

Thạch Czapek

Phương tiện được thiết kế để nuôi cấy vi khuẩn và nấm hoại sinh. Môi trường này chứa nitơ vô cơ. Vì lý do này, môi trường này được coi là chọn lọc, vì chỉ những vi sinh vật có khả năng sử dụng các hợp chất vô cơ làm nguồn nitơ duy nhất mới có thể phát triển.

Thạch EMB

Môi trường hơi chọn lọc và khác biệt, được sử dụng để phân lập Enterobacteriaceae. Escherichia coli đặc biệt được phát hiện trên môi trường này bởi màu xanh lục đen bóng của các khuẩn lạc của nó. Mức độ chọn lọc mà nó sở hữu là do sự hiện diện của thuốc nhuộm anilin (eosin và xanh metylen).

Thạch endo

Môi trường chọn lọc và khác biệt tối thiểu, được sử dụng để phân lập và phân biệt các trực khuẩn Gram âm lên men và không lên men lactose thuộc họ Enterobacteriaceae và các họ khác.

Natri sulfit và fuchsin cơ bản ức chế hầu hết các vi khuẩn Gram dương. Escherichia coli trên môi trường này tạo ra các khuẩn lạc màu đỏ sẫm đặc trưng với ánh kim loại màu xanh lục óng ánh.

Thạch Hektoen

Môi trường chọn lọc và khác biệt để phân lập vi khuẩn gây bệnh đường ruột thuộc các chi Shigella và Salmonella. Là một chất ức chế, nó chứa muối mật, ngăn chặn sự phát triển của vi khuẩn Gram dương và một số vi khuẩn Gram âm.

Thạch Löwenstein-Jensen

Phương tiện được thiết kế đặc biệt để phân lập và phát triển các vi khuẩn thuộc giống Mycobacterium, đặc biệt là các loài vi khuẩn lao, trong số những loài khác.

Môi trường chứa màu xanh lục malachit; Chất này ức chế hệ vi khuẩn Gram dương và Gram âm đi kèm đã có khả năng chống lại sự khử trùng của mẫu trước đó. Nó cũng chứa glycerin kích thích sự phát triển của M. tuberculosis, nhưng lại ức chế sự phát triển của M. bovis và các vi sinh vật khác.

Thạch Mac Conkey

Nó là một phương tiện chọn lọc và khác biệt. Nó được sử dụng để phân lập các thanh Gram âm không khó tính, lên men và không lên men lactose.

Đặc tính chọn lọc của nó được cung cấp bởi sự hiện diện của muối mật và màu tím pha lê. Các chất này ức chế sự phát triển của vi khuẩn Gram dương và một số vi khuẩn Gram âm khó tính.

Thạch mannitol mặn

Thạch chọn lọc và thạch phân biệt để phân lập Staphylococcus aureus. Môi trường này có nồng độ natri clorua cao có tác dụng ức chế sự phát triển của hầu hết các vi khuẩn.

Thạch SS

Môi trường chọn lọc và khác biệt vừa phải để phân lập các chi Salmonella và Shigella. Môi trường chứa các chất ức chế, chẳng hạn như muối mật, natri xitrat, màu xanh lục tươi sáng. Những chất này ngăn chặn sự phát triển của vi khuẩn Gram dương, một số vi khuẩn Gram âm và một số coliform.

Regan Lowe Agar

Thạch chọn lọc để phân lập Bordetella pertussis. Môi trường chứa than củi, cephalexin và amphotericin B làm chất ức chế.

Thạch SABHI

Môi trường chọn lọc để phân lập nấm gây bệnh, chẳng hạn như nấm da, Blastomyces dermatitidis và Histoplasma capsulatum. Chứa chloramphenicol.

Thạch máu ngựa với bacitracin

Môi trường đặc biệt để phân lập Haemophilus influenzae. Bacitracin ức chế hệ thực vật đi kèm.

Thạch than ngựa

Môi trường chọn lọc hữu ích để phục hồi các chủng Bordetella pertussis và B. parapertussis từ các mẫu lâm sàng. Nó chứa cephalexin để ức chế hệ thực vật đi kèm.

Thạch máu Kanamycin-Vancomycin (KV)

Môi trường chọn lọc, đặc biệt để phân lập vi khuẩn kỵ khí, chẳng hạn như Bacteroides, Prevotella, Fusobacterium và Veillonella.

Bismuth Sulfite Agar

Môi trường chọn lọc để phân lập Salmonella enterica phân nhóm enterica typ huyết thanh Typhi. Môi trường này chứa bismuth sulfit màu xanh lục sáng để ức chế sự phát triển của vi sinh vật Gram dương và một số vi khuẩn Gram âm.

Thạch TCBS (thiosulfat, citrat, muối mật)

Môi trường có tính chọn lọc cao để phân lập các loài thuộc giống Vibrio. Nó chứa natri citrate, mật bò và độ pH kiềm ức chế hệ thực vật đi kèm.

Thạch Thayer-Martin

Môi trường chọn lọc và giàu dinh dưỡng cao để phân lập Neisseria meningitidis và Neisseria gonorrhoeae. Hệ thực vật đi kèm bị ức chế bởi sự hiện diện của vancomycin, colistin và nystatin.

Thạch xanh tươi

Môi trường chọn lọc để phân lập các chủng thuộc giống Salmonella. Như tên cho thấy, nó chứa màu xanh lá cây tươi sáng như một chất ức chế. Điều này ngăn cản sự phát triển của vi khuẩn Gram dương và một số lượng lớn vi sinh vật Gram âm.

Thạch Vogel-Johnson

Nó là một môi trường nuôi cấy chọn lọc và khác biệt, được bào chế để phân lập Staphylococcus aureus và ức chế sự phát triển của vi khuẩn Gram âm và thậm chí một số vi khuẩn Gram dương. Các chất ức chế là kali Tellurite, clorua liti và glycine.

Thạch XLD

Nó là một môi trường chọn lọc và khác biệt để phân lập Salmonella và Shigella enteropathogens. Natri deoxycholate tạo ra đặc tính chọn lọc cho môi trường.

CHROMagar (Candida Medium)

Nó là một môi trường chọn lọc và khác biệt để hỗ trợ việc phân lập và xác định các loài Candida. Môi trường có chứa chloramphenicol để ức chế sự phát triển của vi khuẩn.

Middle Ellinghausen McCulough Johnson và Harris (EMJH)

Môi trường chọn lọc để nuôi cấy Leptospiras. Nó chứa polysorbate 80, có tác dụng ức chế sự phát triển của hầu hết các vi khuẩn.

Môi trường nuôi cấy lỏng chọn lọc

BHI Broth NaCL 6,5%

Nước dùng chọn lọc để thu hồi Enterococcus. Nồng độ natri clorua cao ức chế sự phát triển của hệ vi sinh vật đi kèm.

Nước dùng EC

Nước dùng chọn lọc để thu hồi coliform tổng số và phân. Chứa muối mật ức chế sự phát triển của các vi sinh vật khác.

GN nước dùng

Nước dùng chọn lọc để thu hồi Salmonella và Shigella. Chứa natri citrat và natri deoxycholat, có tác dụng ức chế vi khuẩn Gram dương và coliform.

Rappaport-Vassiliadis Broth

Nó là một môi trường làm giàu có chọn lọc cho các loài Salmonella. Chứa xanh malachit làm chất ức chế.

Selenite nước dùng

Đây là một môi trường nuôi cấy chọn lọc, hữu ích để làm giàu mẫu nơi nghi ngờ sự hiện diện của vi khuẩn gây bệnh đường ruột thuộc giống Salmonella.

Đúng như tên gọi của nó, nó có chứa natri selen là chất ức chế, ngăn chặn sự phát triển của vi khuẩn Gram dương và hầu hết các vi khuẩn trong đường tiêu hóa.

Nước dùng tetrathionate

Nước dùng chọn lọc để làm giàu và phục hồi các chủng thuộc giống Salmonella.

Tetrathionat được tạo thành do phản ứng tạo ra giữa natri thiosunfat và dung dịch iốt có trong môi trường ức chế sự phát triển của coliform và hỗ trợ sự phát triển của vi khuẩn có chứa enzym tetrathionat reductase (Salmonella).

Nó cũng chứa muối mật và một số loại bao gồm màu xanh lá cây tươi sáng; cả hai chất đều ức chế hầu hết vi khuẩn Gram dương và một số vi khuẩn Gram âm (coliform).

Campy Thioglycollate Broth

Nước dùng đặc biệt để thúc đẩy sự phát triển của C. jejuni subsp jejuni. Chứa amphotericin B, cephalothin, polymyxin B, trimethropim và vancomycin.

Nước dùng Todd-Hewitt với máu và kháng sinh

Nó giúp làm phong phú các mẫu và thúc đẩy sự phát triển của vi khuẩn Streptococcus agalactiae từ dịch tiết âm đạo. Là chất ức chế, nó chứa axit nalidixic và gentamicin hoặc colistin.

Người giới thiệu

Môi trường nuôi cấy vi sinh lâm sàng (năm học 2012-2013). Có tại: asignatura.us.es
Phòng thí nghiệm BD. Campylobacter Skirrow Agar và Campylobacter Butzler Agar. 2013. Có sẵn tại: bd.com
Phòng thí nghiệm IVD. Löwenstein-Jensen. 2011. Có sẵn tại: bio-rad.com
Phòng thí nghiệm Neogen. Nước dùng GN (Hajna). Có tại: Foodsafety.neogen.com
Phòng thí nghiệm BD. CHROMagar. Candida Medium 2014. Có tại: bd.com
Phòng thí nghiệm BD. Rappaport Vassiliadis Broth. 2003. Có sẵn tại: bd.com
Cổng thông tin điện tử Lifeder.com. Có tại: Lifeder.com
Phòng thí nghiệm BD. Leptospira Medium Base EMJH2011 Có tại: http://legacy.bd.com
Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Chẩn đoán vi sinh. Ấn bản thứ 5. Biên tập Panamericana SA Argentina.
Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Chẩn đoán vi sinh Bailey & Scott. 12 ed. Biên tập Panamericana SA Argentina.

MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY CHỌN LỌC: NỀN, RẮN VÀ LỎNG - SINH HỌC - 2026