KIỂM TRA CHÉO: CHÚNG ĐỂ LÀM GÌ, KỸ THUẬT, CƠ SỞ LÝ LUẬN, CÁC GIAI ĐOẠN - THUỐC - 2025

Các Crossmatch là một số nghiên cứu trong phòng thí nghiệm được tiến hành để xác định xem các sản phẩm máu từ một người hiến tặng (chủ yếu là máu toàn phần và hình cầu đóng gói) tương thích với máu của người nhận.

Đây là một bài kiểm tra bổ sung bổ sung cho khả năng tương thích ABO và yếu tố Rh. Lý do cho sự kết hợp chéo là đôi khi hai cá nhân (người cho-người nhận) có thể có cùng nhóm ABO và Rh nhưng máu của họ vẫn không tương thích.

Nguồn: unsplash.com

Sự không tương thích như vậy là do sự hiện diện của các kháng thể chống lại một loạt các protein của tế bào hồng cầu được gọi là kháng nguyên nhỏ. Những kháng nguyên này không được kiểm tra thường xuyên vì chúng dành cho nhóm máu (ABO) và yếu tố Rh.

Điều này là do các kháng nguyên phụ ít gặp hơn và có biểu hiện thay đổi ở mỗi cá nhân, do đó hầu như không thể nhóm chúng thành các loại như được thực hiện với nhóm và yếu tố Rh.

Thay vào đó, các tế bào hồng cầu của người hiến tặng được trộn với huyết thanh của bệnh nhân (xét nghiệm kết hợp chính) và tế bào hồng cầu của bệnh nhân với huyết thanh của người hiến tặng (xét nghiệm đối sánh nhỏ) để phát hiện sự hiện diện của phản ứng kháng nguyên-kháng thể.

Khi có kháng thể chống lại các kháng nguyên nhỏ, trong huyết thanh của bệnh nhân hoặc người hiến tặng, xét nghiệm được cho là dương tính, vì vậy trong hầu hết các trường hợp, đơn vị máu cụ thể đó không thể truyền được.

ABO Group

Để hiểu đầy đủ về phản ứng chéo là gì, trước tiên bạn cần biết những kiến ​​thức cơ bản về các nhóm máu.

Theo nghĩa này, điều quan trọng nhất là phải biết rằng máu có thể được phân thành bốn nhóm: A, B, AB và O.

Mỗi nhóm này biểu hiện một protein (kháng nguyên) cụ thể trên bề mặt của các tế bào hồng cầu, protein này được xác định là yếu tố ngoại lai bởi các kháng thể của một thụ thể tiềm năng của một nhóm khác.

Điều nổi bật nhất về phản ứng kháng nguyên-kháng thể trong kết hợp máu là không cần tiếp xúc trước với kháng nguyên để kháng thể tồn tại. Đây được gọi là kháng thể tự nhiên.

Kháng thể tự nhiên

Nói chung, để kháng thể tồn tại trong cơ thể của một cá nhân, điều cần thiết là các tế bào bạch cầu của cá nhân đó đã được tiếp xúc với kháng nguyên trước đó.

Điều này có nghĩa là trong lần tiếp xúc đầu tiên giữa kháng nguyên lạ và sinh vật, không có kháng thể nào, vì chúng được tạo ra sau đó, sau lần tiếp xúc đầu tiên. Do đó, hệ thống miễn dịch không thể có kháng thể chống lại ví dụ như một loại virus cụ thể, nếu nó chưa từng tiếp xúc với nó trong quá khứ.

Ngoại lệ duy nhất ở trên là các kháng nguyên kháng AB. Trong những trường hợp này, người đó có kháng thể chống lại kháng nguyên mà hồng cầu của họ không có, mặc dù họ chưa bao giờ tiếp xúc với hồng cầu của người khác. Đây được gọi là kháng thể tự nhiên.

Kháng nguyên và kháng thể liên quan đến nhóm máu

Các nhóm máu được xác định trong trường hợp của hệ ABO bằng sự hiện diện của các kháng nguyên cụ thể (A hoặc B) trên màng hồng cầu và ngược lại, các kháng thể chống lại kháng nguyên không có trên màng hồng cầu.

Do đó, một người có nhóm máu A biểu hiện kháng nguyên A trên bề mặt hồng cầu của mình, trong khi có các kháng thể kháng B trong huyết thanh.

Ngược lại, ở những bệnh nhân nhóm B, kháng nguyên B được tìm thấy trong khi các kháng thể là kháng A.

Tuy nhiên, bệnh nhân nhóm máu AB có cả kháng nguyên A và B. Do đó, không có kháng thể nào vì làm như vậy sẽ phá hủy hồng cầu của người đó.

Hoàn toàn ngược lại xảy ra ở nhóm O, nơi màng hồng cầu không có bất kỳ kháng nguyên nào trong số hai kháng nguyên (cả A và B), trong khi trong huyết thanh có các kháng thể kháng A và kháng B.

Nhóm ABO không tương thích

Từ đó có thể dễ dàng suy ra sự tương hợp của các nhóm máu ABO, vì khi biết kháng nguyên của màng hồng cầu thì tự động biết được kháng thể trong huyết thanh. Vậy nên:

- Nhóm máu A tương hợp với nhóm A và nhóm O.

- Nhóm máu B tương hợp với nhóm máu B và O.

- Những người có nhóm O chỉ có thể nhận máu O (vì họ có kháng thể kháng A và kháng B), mặc dù máu của họ được tất cả các nhóm khác nhận mà không gặp vấn đề gì vì nó thiếu kháng nguyên.

- Cuối cùng. những người có nhóm máu AB có thể nhận máu từ tất cả các nhóm khác (A, B, O và tất nhiên là AB), vì họ không có kháng thể chống lại bất kỳ kháng nguyên nào. Tuy nhiên, chỉ những người thuộc nhóm AB mới có thể nhận máu AB, vì tất cả các nhóm khác đều có kháng thể phá hủy các tế bào hồng cầu này.

Kháng nguyên nhỏ

Cũng như các nhóm ABO, một loạt các protein có thể được tìm thấy trên bề mặt của hồng cầu có chức năng như kháng nguyên giống như kháng nguyên ABO.

Tuy nhiên, những kháng nguyên này không có ở tất cả các cá nhân. Sự kết hợp của chúng là không đồng nhất và mức độ thâm nhập (mức độ biểu hiện của protein) là thay đổi, do đó, việc phân loại thành các nhóm như nhóm tồn tại cho ABO và Rh là không thể. Đây là nơi nó lấy tên từ "kháng nguyên nhỏ", còn được gọi là "kháng nguyên có tần suất thấp".

Mặc dù chúng không thường xuyên nhưng có thể có các kháng thể tự nhiên chống lại các kháng nguyên nhỏ. Trong đó phổ biến nhất là Lewis, MNSs, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb và Kidd. Tất cả chúng đều gây ra các phản ứng tan máu và sau truyền máu rất nghiêm trọng.

Ngoài ra, có thể xảy ra trường hợp nhạy cảm với các kháng nguyên nhỏ do tiếp xúc trước đó, hoặc với các protein kháng nguyên nói trên do truyền máu trước đó hoặc do miễn dịch chéo.

Miễn dịch chéo

Người ta nói rằng có miễn dịch chéo khi hai kháng nguyên từ hai nguồn khác nhau (ví dụ tế bào hồng cầu và vi khuẩn) rất giống nhau, đến mức các kháng thể chống lại một trong những protein kháng nguyên này cũng phản ứng với kháng nguyên kia vì chúng gần như giống hệt nhau. .

Để hiểu rõ hơn điều này, hãy lấy ví dụ giả thuyết trước (kháng nguyên từ hồng cầu và vi khuẩn). Trong cả hai trường hợp đều không có kháng thể tự nhiên, nhưng nếu một người tiếp xúc với vi khuẩn, họ sẽ tạo ra kháng thể chống lại nó.

Các kháng thể như vậy sau này sẽ phản ứng chống lại tế bào hồng cầu nếu các kháng nguyên của nó rất giống với kháng nguyên của vi khuẩn đã tạo ra các kháng thể.

Nếu điều này xảy ra, các tế bào hồng cầu với protein kháng nguyên cụ thể đó không thể được trao cho người có kháng thể, vì sẽ có sự đào thải. Ở đây nói lên tầm quan trọng của phản ứng chéo.

Kết hợp chéo để làm gì?

Vì không thể nhóm máu của các cá nhân khác nhau dựa trên các kháng nguyên phụ, cách duy nhất để biết liệu có kháng thể chống lại các kháng nguyên phụ của các tế bào hồng cầu của người khác trong máu của một người là thông qua quá trình ghép chéo. .

Trong những trường hợp có kháng thể, phản ứng tan máu hoặc ngưng kết được kích hoạt, đó là lý do tại sao người ta kết luận rằng phản ứng đó là dương tính; nghĩa là có các kháng thể chống lại các kháng nguyên nhỏ (mặc dù không biết chính xác là kháng nguyên nào). Nếu không thì kết quả là âm tính.

Nền tảng

Kết hợp chéo dựa trên phản ứng kháng nguyên-kháng thể. Do đó, với chúng, có thể phát hiện xem trong huyết thanh của người nhận có kháng thể chống lại kháng nguyên của hồng cầu của người cho hay không (hoặc ngược lại), gây ra phản ứng kháng nguyên-kháng thể.

Nếu không có kháng thể, không có phản ứng xảy ra và xét nghiệm được báo cáo là âm tính. Ngược lại, nếu phản ứng dương tính (có tan máu hoặc ngưng kết trong quá trình xét nghiệm) thì có thể kết luận là có kháng thể.

Theo nghĩa này, điều quan trọng cần lưu ý là có thể có kháng thể chống lại các tế bào hồng cầu trong huyết thanh của cả người cho và người nhận. Đây là lý do tại sao có hai loại phản ứng chéo.

Các loại phản ứng chéo

Các kháng thể chống lại hồng cầu của người hiến tặng có thể tồn tại trong huyết thanh của bệnh nhân; nhưng điều ngược lại cũng có thể xảy ra, đó là kháng thể trong huyết thanh của người hiến tặng chống lại hồng cầu của bệnh nhân.

Đó là lý do tại sao có hai loại crossmatch:

- Kết hợp chéo chính.

- Chéo chéo nhỏ.

Cả hai loại đều được thực hiện thường quy trong ngân hàng máu trước khi truyền các sản phẩm máu, vì nếu bất kỳ xét nghiệm nào cho kết quả dương tính thì sẽ có nguy cơ cao xảy ra phản ứng truyền máu gây nguy hiểm đến tính mạng của bệnh nhân.

Crossmatch chính

Xét nghiệm này đánh giá liệu huyết thanh của người nhận có chứa kháng thể đối với tế bào hồng cầu của người hiến tặng hay không.

Nếu điều này xảy ra, các sản phẩm máu không thể được sử dụng, vì một lượng lớn kháng thể có trong huyết tương của bệnh nhân sẽ phá hủy các tế bào hồng cầu của người cho rất nhanh chóng, tạo ra các phản ứng thảm khốc trong cơ thể người nhận trong quá trình này. Những phản ứng này nghiêm trọng đến mức có thể đe dọa đến tính mạng.

Trận đấu chéo nhỏ

Trong trường hợp này, người ta xác định xem có kháng thể chống lại các tế bào hồng cầu của người nhận trong huyết thanh của người hiến tặng hay không.

Nếu vậy, các kháng thể sẽ bắt đầu phá hủy hồng cầu của người nhận. Tuy nhiên, do số lượng kháng thể có hạn nên phản ứng ít dữ dội hơn; mặc dù nó vẫn nguy hiểm.

Giai đoạn

Cả hai trận đấu chéo chính và phụ được chia thành ba giai đoạn:

- Nước muối.

- Ủ nhiệt hoặc ủ.

- Coombs.

Trong giai đoạn đầu, các tế bào hồng cầu và huyết thanh được trộn lẫn trong dung dịch muối. Sau đó, albumin được thêm vào, và mẫu được ủ ở 37ºC trong 30 phút để cuối cùng tiến hành giai đoạn coombs.

Kỹ thuật

Kỹ thuật ghép chéo tương đối đơn giản, vì nó liên quan đến việc thêm các tế bào hồng cầu của người hiến vào huyết thanh của bệnh nhân (kết hợp chéo chính) cũng như hồng cầu người nhận vào huyết thanh của người hiến (kết hợp chéo nhỏ).

Để tạo ra phản ứng kháng nguyên-kháng thể trong thời gian tương đối ngắn, phải tuân theo một loạt các bước chuẩn hóa. Các bước này được tóm tắt theo cách đơn giản dưới đây.

Điều quan trọng cần lưu ý là phần tiếp theo mô tả thử nghiệm tương thích chính, mặc dù các bước giống với thử nghiệm tương thích nhỏ, nhưng trao đổi nguồn gốc của tế bào hồng cầu và huyết thanh.

Pha muối

- Thêm vào ống nghiệm 2 giọt huyết thanh của người nhận (từ người cho nếu là huyết thanh nhỏ).

- Lấy mẫu hồng cầu từ người cho (từ người nhận nếu là mẫu chéo nhỏ).

- Rửa và ly tâm tách hồng cầu.

- Chi tiêu lại trong một giải pháp từ 3% đến 5%.

- Nhỏ một giọt dung dịch này vào ống chứa huyết thanh của người nhận.

- Trộn nhẹ nhàng.

- Máy ly tâm.

- Đọc kết quả trên đèn hiển thị.

Pha nhiệt

- Thêm 2 giọt albumin 22% vào ống đã pha nước muối xong.

- Ủ ở 37ºC trong 30 phút.

- Ly tâm trong 15 giây.

- Đọc kết quả trên đèn hiển thị.

Giai đoạn coombs

- Lấy tế bào ra khỏi ống và rửa bằng dung dịch nước muối.

- Loại bỏ phần nổi phía trên.

- Thêm hai giọt thuốc thử Coombs.

- Trộn nhẹ nhàng.

- Ly tâm trong 15 đến 30 giây.

- Tái tạo tế bào và đánh giá trên đèn xem có ngưng kết hay tán huyết hay không.

Nếu có sự ngưng kết hoặc tan máu trong bất kỳ giai đoạn nào, kết quả được coi là dương tính.

Người giới thiệu

1. Hall, TC, Pattenden, C., Hollobone, C., Pollard, C., & Dennison, AR (2013). Chính sách truyền máu trong phẫu thuật tổng quát tự chọn: làm thế nào để tối ưu hóa tỷ lệ truyền máu chéo. Y học Truyền máu và Trị liệu, 40 (1), 27-31.
2. Silvergleid, AJ, Wells, RF, Hafleigh, EB, Korn, G., Kellner, JJ, & Grumet, FC (1978). Thử nghiệm tương thích bằng cách sử dụng 51 tế bào hồng cầu được đánh dấu Chromium ở những bệnh nhân dương tính chéo. Truyền máu, 18 (1), 8-14.
3. Kulkarni, N., Ali, M., Haray, PN, Joseph, A., & Masoud, A. (2006). Hệ thống đối sánh chéo điện tử. Có Cần Lấy Máu Chéo Trước Khi Phẫu Thuật Định Kỳ để Cắt Bỏ Đại Trực Tràng Không ?. Nội soi, 38 (11), Poster_50.
4. Heal, JM, Blumberg, N., & Masel, D. (1987). Đánh giá sự đối sánh chéo, HLA và ABO đối với việc truyền tiểu cầu cho bệnh nhân chịu lửa. Máu, 70 (1), 23-30.
5. Arslan, Ö. (2006). Đối sánh điện tử. Tổng quan về y học truyền dịch, 20 (1), 75-79.
6. Wu, KK, Hoak, JC, Koepke, JA và Thompson, JS (1977). Lựa chọn người hiến tặng tiểu cầu tương thích: đánh giá tiền cứu của ba kỹ thuật kết hợp chéo. Truyền máu, 17 (6), 638-643.
7. Schonewille, H., Zijl, AMV & Wijermans, PW (2003). Tầm quan trọng của các kháng thể chống lại các kháng nguyên RBC tỷ lệ thấp trong đối sánh chéo hoàn chỉnh và viết tắt. Truyền máu, 43 (7), 939-944.