MACCONKEY AGAR: CƠ SỞ LÝ LUẬN, CHUẨN BỊ VÀ SỬ DỤNG - SINH HỌC - 2026

Các thạch MacConkey là một môi trường rắn cho phép cô lập độc quyền của các vi khuẩn Gram âm. Vì lý do này, nó là một môi trường chọn lọc và cũng cho phép phân biệt giữa trực khuẩn lên men lactose và không lên men, điều này làm cho nó trở thành một môi trường phân biệt. Đây là một trong những môi trường nuôi cấy được sử dụng rộng rãi nhất trong phòng thí nghiệm vi sinh.

Môi trường này chủ yếu được sử dụng để phân lập các trực khuẩn Gram âm thuộc họ Enterobacteriaceae, bao gồm các loài gây bệnh cơ hội và gây bệnh đường ruột.

Hạt thạch MacConkey chứa hai loại vi khuẩn. Khuẩn lạc lên men lactose bên trái, khuẩn lạc lên men không lactose bên phải.

Nó cũng có thể được sử dụng để phân lập các trực khuẩn ruột khác sống trong đường tiêu hóa, nhưng không thuộc họ Enterobacteriaceae, chẳng hạn như Aeromonas sp, Plesiomonas sp, trong số những loại khác.

Cuối cùng, nó có thể phân lập các trực khuẩn Gram âm không lên men glucose khác được tìm thấy trong môi trường, nước hoặc đất, nhưng đôi khi có thể là mầm bệnh cơ hội như Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alcaligenes sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, trong số những loại khác.

Nền tảng

Thạch MacConkey

Nền tảng của phương tiện này có thể được giải thích thông qua mô tả các thành phần của nó, vì mỗi phương tiện có một mục đích xác định một thuộc tính của nó.

Muối mật và tinh thể màu tím

Theo nghĩa này, thạch MacConkey có thành phần phức tạp. Trước hết nó chứa muối mật và tinh thể màu tím.

Các nguyên tố này có nhiệm vụ ức chế sự phát triển của vi khuẩn Gram dương và một số trực khuẩn Gram âm khó tính. Đổi lại, nó tạo điều kiện cho sự phát triển của các trực khuẩn Gram âm không bị ảnh hưởng bởi các chất này. Do đó nó là một phương tiện chọn lọc.

Nó được cho là hơi chọn lọc so với các phương tiện khác cũng ức chế sự phát triển của vi khuẩn Gram dương và hầu hết các vi khuẩn Gram âm.

Peptones, polypectones và lactose

Nó chứa các chất cung cấp các chất dinh dưỡng cần thiết cho vi sinh vật phát triển trong môi trường này, chẳng hạn như peptone, polypectones và lactose.

Lactose là điểm mấu chốt để môi trường trở thành môi trường vi phân, vì vi sinh vật có khả năng lên men lactose sẽ phát triển mạnh các khuẩn lạc có màu hồng.

Một số vi khuẩn có thể lên men lactose chậm hoặc yếu, phát triển các khuẩn lạc màu hồng nhạt và vẫn dương tính với lactose.

Những loại không lên men lactose sử dụng pepton làm nguồn năng lượng, tạo ra amoniac, kiềm hóa môi trường. Vì lý do này, các khuẩn lạc bắt nguồn là không màu hoặc trong suốt.

Chỉ báo PH

Sự thay đổi màu sắc được thực hiện thông qua một hợp chất thiết yếu khác mà thạch MacConkey có. Hợp chất này là chất chỉ thị pH, trong trường hợp này là màu đỏ trung tính.

Quá trình lên men đường lactose tạo ra các axit hỗn hợp. Chúng axit hóa môi trường đến độ pH dưới 6,8.

Điều này làm cho chỉ thị pH chuyển sang màu hồng đậm. Cường độ của màu có thể thay đổi tùy thuộc vào độ pH cuối cùng.

Nước cất, natri clorua và thạch

Mặt khác, nó chứa nước cất và natri clorua giúp cân bằng độ ẩm và thẩm thấu. Cuối cùng, môi trường chứa thạch, là cơ sở cung cấp độ nhất quán của môi trường rắn.

Môi trường thạch MacConkey đã chuẩn bị phải có pH cuối cùng được điều chỉnh đến 7,1 ± 0,2.

Sự chuẩn bị

Đối với một lít thạch MacConkey, phải cân 50 g môi trường khử nước, sau đó cho vào bình và hòa tan trong một lít nước cất. Sau 10 phút để yên, nó được đun nóng, trộn liên tục cho đến khi sôi trong 1 phút.

Sau đó đặt bình vào nồi hấp tiệt trùng ở 121 ° C trong 20 phút. Vào cuối thời gian, nó được lấy ra khỏi nồi hấp và để nguội cho đến khi đạt đến nhiệt độ 45 ° C, để phục vụ sau đó trong các đĩa Petri vô trùng bên trong tủ hút tầng hoặc phía trước lò đốt Bunsen.

Để đông đặc và bảo quản trong ngăn đĩa đảo ngược và cho vào tủ lạnh ở 2-8 ° C cho đến khi sử dụng.

Để thu được thạch MacConkey có tác dụng ức chế hiệu ứng biến dạng do giống Proteus, người ta sử dụng thạch MacConkey ít muối.

Công dụng của thạch MacConkey thông thường

MacConkey Agar được bao gồm trong tất cả các bộ môi trường nuôi cấy được sắp xếp để gieo các mẫu lâm sàng nhận được trong phòng thí nghiệm. Nó cũng hữu ích trong vi sinh thực phẩm và vi sinh môi trường.

Sự đa dạng của các thanh Gram âm phát triển trong môi trường này biểu hiện các đặc điểm kiểu hình giúp đưa ra chẩn đoán giả định về loài được đề cập. Ví dụ, kích thước, màu sắc, độ đặc và mùi của khuẩn lạc là một số đặc điểm có thể định hướng.

Trong môi trường này, các loài Escherichia coli, Klebsiella sp và Enterobacter sp tạo ra các khuẩn lạc màu hồng đậm, được bao quanh bởi một vùng mật kết tủa.

Trong khi đó, các vi khuẩn như Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp và Hafnia sp có thể không màu sau 24 giờ hoặc màu hồng nhạt trong 24-48 giờ.

Tương tự như vậy, các chi Proteus, Edwadsiella, Salmonella và Shigella tạo ra các khuẩn lạc không màu hoặc trong suốt.

Các biến thể khác của thạch MacConkey

Có các biến thể khác của MacConkey Agar có các mục đích cụ thể. Chúng được đề cập dưới đây:

Thạch MacConkey với sorbitol

Môi trường này được thiết kế để phân biệt chủng vi khuẩn gây bệnh đường ruột (Escherichia coli O157: H7) với các chủng Escherichia coli còn lại.

Môi trường này trao đổi lactose carbohydrate thành sorbitol. Các chủng E. coli sinh ruột O157: H7 khác với các chủng còn lại vì chúng không lên men sorbitol và do đó thu được các khuẩn lạc trong suốt, trong khi các chủng E. coli còn lại lên men sorbitol và các khuẩn lạc có màu hồng đậm.

Thạch MacConkey không có màu tím pha lê, không có muối

Loại thạch này khác rất nhiều so với thạch MacConkey cổ điển, vì nó không có tinh thể màu tím và vi khuẩn Gram dương có thể phát triển.

Mặt khác, việc không có muối sẽ ức chế sự xuất hiện của đám đông trên thạch được tạo ra bởi một số trực khuẩn đường ruột, chẳng hạn như những loài thuộc giống Proteus, và do đó tạo điều kiện phân lập tất cả các vi khuẩn có mặt, kể cả vi khuẩn Gram dương.

MacConkey agar với cefoperazone

Biến thể MacConkey Agar này được thiết kế để ban đầu phân lập Laribacter hongkongensis và sau đó được phát hiện hữu ích cho việc phân lập Arcobacter butzleri. Cả hai đều là thanh Gram âm hơi cong có khả năng chống lại cefoperazon.

Những vi khuẩn này gần đây có liên quan đến việc gây ra bệnh viêm dạ dày ruột và tiêu chảy mắc phải ở người châu Á và châu Âu, nổi lên như hai tác nhân gây bệnh mới nổi mạnh mẽ.

Thuốc kháng sinh cho phép ức chế hệ thực vật đi kèm trong đường tiêu hóa, hỗ trợ sự phát triển của những vi khuẩn này, ngăn chúng không bị chú ý, vì chúng cần 72 giờ để phát triển.

Thạch MacConkey được pha chế với nước biển ở 10% v / v

Biến thể này hữu ích cho việc đánh giá các chỉ số vệ sinh của vi khuẩn đối với ô nhiễm phân, bao gồm cả tổng số coliform và coliform trong phân ở vùng nước mặn giải trí (bãi biển và vịnh).

Cortez và cộng sự vào năm 2013 đã chứng minh rằng môi trường được chuẩn bị theo cách này làm tăng đáng kể sự phục hồi của các vi sinh vật này trong môi trường muối, so với việc sử dụng thạch MacConkey được chuẩn bị bằng nước cất.

Điều này là do môi trường biến đổi kích thích sự phát triển của vi khuẩn sinh lý ở trạng thái tiềm tàng "sống được nhưng không thể nuôi cấy", do đó chúng không thể phục hồi được trong môi trường thông thường.

Người giới thiệu

1. Lau SK, Woo PC, Hui WT, et al. Sử dụng thạch cefoperazone MacConkey để phân lập chọn lọc Laribacter hongkongensis. J Clin Vi sinh vật. Năm 2003; 41 (10): 4839-41.
2. Thạch MacConkey. Wikipedia, Bách khoa toàn thư miễn phí. Ngày 4 tháng 4 năm 2018, 18:16 giờ UTC. Ngày 29 tháng 12 năm 2018, 15:22 vi.wikipedia.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Chẩn đoán vi sinh Bailey & Scott. 12 ed. Argentina. Biên tập Panamericana SA
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Chẩn đoán vi sinh. (Xuất bản lần thứ 5). Argentina, Biên tập Panamericana SA
5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy được chuẩn bị với nước biển đối với các chỉ số sức khỏe trong nước biển của các spa ở Chichiriviche, bang Falcón, Venezuela. Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Thực hành vi sinh lâm sàng. Đại học Cadiz, tái bản lần thứ 2. Dịch vụ xuất bản UCA.