VÒNG LẶP VI KHUẨN: ĐẶC ĐIỂM, LOẠI, SỬ DỤNG - SINH HỌC

Các vòng lặp vi khuẩn là một công cụ làm việc được sử dụng bởi vi sinh cho gieo cấy vi sinh vật (vi khuẩn hoặc nấm). Nó có lẽ là công cụ được các chuyên gia này sử dụng nhiều nhất.

Việc sử dụng nó tưởng chừng như đơn giản nhưng thực ra nó cần phải được đào tạo rất nhiều. Trước khi bắt đầu gieo hạt, vòng lặp phải được khử trùng trong lò đốt Bunsen, sau đó cấy vi sinh vật có thể đến từ môi trường nuôi cấy lỏng hoặc nuôi cấy rắn.

Các loại vòng xoắn khuẩn. Nguồn: Không cung cấp tác giả có thể đọc bằng máy. ばやお giả định (dựa trên khiếu nại về bản quyền).

Sau khi chất cấy được lấy, nó có thể được nuôi trong môi trường lỏng hoặc cấy giống trong môi trường rắn. Sau mỗi quy trình, vòng lặp lại được khử trùng. Tay cầm này cũng thích hợp để làm các vết bẩn vi sinh trên một slide.

Vòng lặp vi khuẩn học có nhiều tên gọi, bao gồm: vòng lặp hay vòng platin, vòng cấy hoặc vòng hạt, tuy nhiên tên thật của nó là vòng lặp Kohle.

Vật liệu làm tay cầm thường là hợp kim niken-crom (nichrome) hoặc bạch kim. Một loại khác có sẵn trên thị trường là vòng nhựa vi khuẩn dùng một lần.

Mặt khác, có một số loại vòng lặp vi khuẩn, mỗi vòng hoàn thành một chức năng trong các nhiệm vụ do nhà vi sinh vật thực hiện. Việc lựa chọn tay cầm sẽ phụ thuộc vào những gì cần phải làm.

Ví dụ, để thực hiện một thể vân bằng cách cạn kiệt nhằm phân lập vi sinh vật, người ta sử dụng vòng bạch kim, kết thúc bằng một vòng kín, bất kể nó có được hiệu chuẩn hay không.

Trong khi đó, nếu gieo mẫu nước tiểu, nơi quan trọng là định lượng CFU, thì cần phải sử dụng vòng đã được hiệu chuẩn. Tương tự như vậy, để cấy các xét nghiệm sinh hóa, yêu cầu được gieo bằng cách chọc thủng, thì vòng kim là rất cần thiết. Điều quan trọng là tay cầm được xử lý bởi nhân viên được đào tạo.

nét đặc trưng

Các vòng vi khuẩn được tạo thành từ hai thái cực. Một đầu tương ứng với tay cầm hoặc đế, trong khi đầu kia là chính tay cầm.

Xử lý đế hoặc tay cầm

Phần đế làm nhiệm vụ giữ chặt tay cầm trong quá trình cầm nắm. Nó thường bằng kim loại, nhưng có lớp cách nhiệt để người điều khiển không bị bỏng khi khử trùng đầu tay cầm trên bật lửa. Nó có kích thước xấp xỉ 20 cm, mặc dù nó có thể dài hơn. Nó có một sợi để điều chỉnh tay cầm.

Xử lý

Đó là phần cuối chức năng, tức là phần tiếp xúc với vi sinh vật và với môi trường nuôi cấy. Nó bao gồm một dây mảnh được đưa vào đế.

Tay cầm có thể được làm bằng nichrome hoặc bạch kim, đó là lý do tại sao nó đôi khi được gọi là tay cầm bạch kim. Nó dài khoảng 6,5 cm và có đường kính khoảng 0,20 mm. Tay cầm có tay cầm có thể đo được 26,5 cm. Các phép đo có thể khác nhau giữa các nhà sản xuất.

Các loại

Có một số loại vòng lặp vi khuẩn và mỗi loại có một công dụng cụ thể. Các loại tay cầm như sau: tay cầm hình vòng đã hiệu chỉnh, tay cầm hình vòng tròn không hiệu chỉnh, tay cầm thẳng hoặc kim, tay cầm có vân, tay cầm hình chữ “L” và tay cầm có đầu nhọn.

Mặt khác, tay cầm có thể vĩnh viễn hoặc dùng một lần. Những thứ để sử dụng lâu dài được khử trùng trong bật lửa, có thể tái sử dụng và rất bền. Mặc dù đồ dùng một lần được vô trùng từ nhà máy, chúng chỉ được sử dụng một lần và bị loại bỏ.

Các ứng dụng

Tay cầm vòng, chưa được hiệu chỉnh

Nó là tay cầm được sử dụng nhiều nhất trong phòng thí nghiệm vi sinh. Nó được sử dụng để lấy một chất cấy của huyền phù vi sinh vật (môi trường lỏng) hoặc một phần khuẩn lạc (môi trường rắn), để cấy vào một môi trường nuôi cấy khác, thử nghiệm sinh hóa hoặc một môi trường làm giàu hoặc chọn lọc hơn, tùy từng trường hợp. Nó cũng hữu ích để làm vết bẩn vi sinh vật trên phiến kính.

Với loại vòng lặp này, chất cấy ban đầu có thể bị sọc. Nó cũng được thiết kế để nó lướt nhẹ nhàng trên thạch mà không làm hỏng nó. Tất nhiên, điều này đòi hỏi một nhân viên được đào tạo để xử lý kỹ thuật gieo hạt, tác dụng lực và động tác chính xác để tạo ra một sải chân tốt.

Có thể thực hiện nhiều kỹ thuật gieo hạt khác nhau với tay cầm này. Ví dụ, môi trường rắn trong đĩa Petri thường được tạo mầm khi cạn kiệt (có một số kỹ thuật, xem video 1).

Kỹ thuật này nhằm mục đích thu được các khuẩn lạc đã phân lập để nghiên cứu và xác định chúng, đặc biệt khi mẫu là vi sinh vật đa vi khuẩn, tức là mẫu nuôi cấy không tinh khiết (chứa nhiều hơn một loại vi sinh vật).

Thay vào đó, các nêm được trồng theo hình zic zắc đơn giản để thu được khối lượng vi khuẩn, không cần thiết trong trường hợp này để phân lập các khuẩn lạc.

Đôi khi chúng cũng được sử dụng để lấy một số mẫu nhất định. Ví dụ, Rojas và cộng sự đã sử dụng vòng lặp vi khuẩn học để thu thập các mẫu mô âm đạo bị cạo từ chuột.

Vòng cấy vi khuẩn có đầu vòng, chưa được hiệu chuẩn. Nguồn: Pixinio.com

Tay cầm hình nhẫn, được hiệu chỉnh

Tay cầm này như tên gọi của nó được hiệu chuẩn để lấy một lượng huyền phù vi sinh cụ thể. Nó được sử dụng khi cần thiết để chế phẩm tuân thủ các tiêu chuẩn trong kỹ thuật.

Ví dụ, nó là rất phổ biến để trồng cấy nước tiểu. Trong trường hợp này, có thể sử dụng vòng hiệu chuẩn 0,01 ml và 0,001 ml.

Cần lưu ý rằng các tay cầm đã hiệu chuẩn có biên độ sai số, sai số này thay đổi tùy theo góc lấy mẫu và kích thước miệng của vật chứa.

Nếu vòng 0,001 ml được lắp thẳng đứng vào vật chứa có miệng nhỏ (≤ 7 mm), lượng lấy ra sẽ ít hơn 50% so với mong muốn.

Điều này xảy ra do đường kính miệng bình càng nhỏ, sức căng bề mặt càng cao và do đó lực dính giữa (thủy tinh - chất lỏng) tăng lên. Điều này làm cho điện tích chất lỏng do tay cầm lấy ít hơn.

Trong khi đó, nếu nó được lấy ở một góc 45 ° trong một vật chứa có miệng rộng (≥ 22 mm) thì có thể thu được nhiều hơn 150% so với lượng yêu cầu. Trong trường hợp này, sức căng bề mặt thấp hơn và lực dính thủy tinh / nhựa giảm, trong khi lực dính lỏng-lỏng tăng lên.

Vì những lý do trên, các phương pháp khác để định lượng các đơn vị hình thành khuẩn lạc đôi khi được ưu tiên cho việc cấy nước tiểu.

Cán thẳng hoặc kim

Nó còn được gọi là tay cầm luồng. Nó được sử dụng để cấy một số xét nghiệm sinh hóa, đặc biệt là những xét nghiệm yêu cầu được cấy giống bằng kỹ thuật chọc thủng. Ví dụ, môi trường bán rắn được điều chế ở dạng khối, chẳng hạn như: môi trường SIM, MIO và O / F.

Ngoài ra, trong trường hợp MIO và SIM đánh giá nhu động, điều quan trọng là chọc dò phải được thực hiện bằng một vòng kim, vì việc giải thích nhu động dương tính xảy ra khi vi khuẩn phát triển về phía các mặt của chất cấy ban đầu.

Thử nghiệm được cấy bằng một vòng lặp có thể làm sai lệch kết quả (dương tính giả). Vì lý do này, trong kiểu gieo hạt này, cần phải cẩn thận để vết đâm thủng là duy nhất và khi lấy ra, vết thủng sẽ ra theo cùng hướng mà vết đâm vào.

Một thử nghiệm khác phải được cấy hạt kim mặc dù nó được chuẩn bị theo hình nêm là Kligler. Trong thử nghiệm này, không nên để oxy thâm nhập sâu vào thạch, vì môi trường nghèo oxy cần thiết để xảy ra một số phản ứng hóa học. Tay cầm này cũng được sử dụng để chạm vào một thuộc địa cụ thể với mục đích nuôi cấy con.

Spatulate tay cầm

Hầu hết vi sinh vật cho khuẩn lạc mềm, dễ rụng. Tuy nhiên, có một số tác nhân vi sinh vật có khuẩn lạc cứng và khô, ví dụ vi khuẩn mycobacteria nói chung và một số loại nấm. Trong những trường hợp này, rất hữu ích khi sử dụng tay cầm spatulate.

Tay cầm hình chữ "L"

Việc sử dụng thường xuyên nhất của nó là để đánh dấu nền văn hóa nấm, đặc biệt là nấm mốc.

Tay cầm đầu nhọn

Nó rất hữu ích để lấy các khuẩn lạc rất nhỏ có trong môi trường nuôi cấy đa vi khuẩn, để có thể cấy truyền chúng.

Kỹ thuật gieo hạt

Video 1

Khử trùng tay cầm bằng bạch kim

Tay cầm phải được tiệt trùng trước và sau khi sử dụng. Để khử trùng vòng xoắn khuẩn trong bật lửa, hãy tiến hành như sau: tay cầm phải được đặt ở phía trên ngọn lửa, theo một vị trí càng thẳng đứng càng tốt, sao cho khử trùng từ đầu ngọn lửa trở lên.

Khi sợi mịn chuyển sang màu đỏ tươi, nó có thể được cho là vô trùng. Để sử dụng, nó được làm lạnh và lấy mẫu đã chọn. (Xem video 2).

Khử trùng vòng lặp vi khuẩn

Video 2

Người giới thiệu

"Vòng lặp vi khuẩn" Wikipedia, Bách khoa toàn thư miễn phí. 23 tháng 7 năm 2019, 13:31 UTC. 18 tháng 8 năm 2019, 22:45. Wikipedia.
Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Tay cầm kim loại hiệu chuẩn dành cho nhà vi sinh vật học: Một sự thay thế của sản xuất quốc gia. Soc. Hãy đến. Vi sinh. Năm 2010; 30 (1): 37-42. Có tại: ve.scielo.org
Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Chẩn đoán vi sinh Bailey & Scott. 12 ed. Biên tập Panamericana SA Argentina.
Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Chẩn đoán vi sinh. Ấn bản thứ 5. Biên tập Panamericana SA Argentina.
Rojas A, Pardo-Novoa J, Río R, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F, et al. Xác định tác dụng giảm đau của chiết xuất hexan từ hoa Eupatorium arsenei trong mô hình đau cấp tính ở chuột. mex. khoa học. nông trại. Năm 2015; 46 (1): 64-69. Có tại: scielo.org

VÒNG LẶP VI KHUẨN: ĐẶC ĐIỂM, LOẠI, SỬ DỤNG - SINH HỌC - 2026