LACTOPHENOL BLUE: ĐẶC ĐIỂM, THÀNH PHẦN, BÀO CHẾ, CÔNG DỤNG - HÓA HỌC - 2025

Các màu xanh lactophenol hoặc bông xanh được chuẩn bị với các tính chất thuốc nhuộm duy nhất. Nó được sử dụng trong các phòng thí nghiệm lâm sàng để tạo màu chủ yếu cho các cấu trúc nấm như sợi nấm, ống mầm và bào tử.

Nó giúp chẩn đoán giả định hoặc sơ bộ một số loại nấm, tuy nhiên, luôn nên củng cố chẩn đoán bằng các xét nghiệm cụ thể hơn, chẳng hạn như xét nghiệm sinh hóa hoặc huyết thanh học.

Biểu diễn đồ thị vết màu xanh lactophenol, vết bẩn nhuộm màu xanh lactophenol, chế phẩm gắn kính hiển vi. Nguồn: public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8

Màu xanh lactophenol được tạo thành từ axit lactic, màu xanh anilin, glycerin, phenol và nước khử ion. Nó có thể được chuẩn bị trong phòng thí nghiệm hoặc có thể mua sẵn để sử dụng. Sau khi chuẩn bị, nó đã sẵn sàng để sử dụng, trong mọi trường hợp không được pha loãng, vì hành động này sẽ cho kết quả khủng khiếp.

Nồng độ các thành phần của nó làm cho nó trở nên lý tưởng để nhuộm cấu trúc nấm, vì phenol loại bỏ hệ vi sinh vật đi kèm, trong khi axit lactic tạo ra một lớp màng bảo vệ xung quanh cấu trúc nấm. Cuối cùng, màu xanh anilin có ái lực bám vào các cấu trúc của nấm.

Nền tảng

Với màu xanh lam lactophenol, việc nhuộm đơn giản các cấu trúc nấm của một loại vi khuẩn nuôi cấy nhất định được thực hiện. Nó được gọi là đơn giản vì nó chỉ sử dụng một chất tạo màu.

Ngoài tác dụng nhuộm màu, lactophenol blue còn hoạt động như một chất làm trong của mẫu, nhờ tác dụng chung của axit lactic và phenol, ngoài ra, phenol hoạt động như một chất hòa tan và đồng thời ngăn cản sự ly giải của vi sinh vật bằng cách ức chế các enzym thủy phân. có thể có mặt.

Trong khi axit lactic bảo tồn hình thái cấu trúc của nấm.

Mặt khác, màu xanh anilin có đặc tính kết dính hoặc liên kết với các cấu trúc chứa chitin. Các cấu trúc được nhuộm màu xanh nhạt.

Cần lưu ý rằng thành tế bào của vi sinh vật nấm, đặc biệt là nấm mốc, có chứa chitin, đó là lý do tại sao thuốc nhuộm này là lý tưởng để nhuộm các vi sinh vật này.

nét đặc trưng

Dung dịch xanh lam lactophenol là một chất nhuộm màu trong nước có tính axit mạnh, hơi đục, có màu xanh lam nhạt. Nó vẫn ổn định nếu nó được bảo quản trong khoảng từ 15 ° C đến 25 ° C. Chai phải được đậy kín. Nó gây kích ứng và ăn mòn da và màng nhầy.

Thành phần

Công thức để điều chế một lít lactophenol blue như sau:

-250 g / L axit lactic

-1,0 g / L màu xanh anilin hoặc xanh metyl

-500 g / L glycerin

-250 g / L phenol

-250 ml nước cất hoặc khử ion.

Phenol được hòa tan trong nước đã được làm ấm trước đó. Axit lactic và glycerin được thêm vào và trộn đều. Cuối cùng, màu xanh anilin tan dần. Nó trộn lại và sẵn sàng để sử dụng.

Các phần để pha được 80 ml dung dịch xanh lactophenol là:

-20 g tinh thể phenol

-20 ml axit lactic

-40 ml glycerin hoặc glycerol

-20 ml nước cất.

Sử dụng

Nó được sử dụng để nhuộm các cấu trúc của nấm và thông qua các đặc điểm hình thái quan sát được ở cấp độ hiển vi để có thể đưa ra chẩn đoán giả định là nấm.

Quá trình

Nhuộm cấu trúc nấm của môi trường nuôi cấy

- Nuôi cấy thuần chủng loại nấm có cấu trúc cần quan sát.

- Tốt hơn là làm việc trong tủ hút tầng, hoặc dưới bật lửa, sử dụng khẩu trang và găng tay, vì cần phải tuân thủ các tiêu chuẩn an toàn sinh học, vì hầu hết các loại nấm mốc đều dễ phát tán trong môi trường và do đó gây nguy hiểm cho người điều hành.

- Nhỏ một giọt màu xanh lactophenol lên phiến kính.

- Cắt một hình vuông nhỏ bằng băng dính chất lượng tốt và dán rất cẩn thận vào đầu của tay cầm platin đã được khử trùng lạnh.

- Tay cầm bằng bạch kim được đưa đến gần phần bề ngoài nhất của khuẩn lạc nấm và chạm vào dịch cấy rất cẩn thận, chính xác vị trí của băng dính.

- Sau đó, nó được đưa đến lam kính và đặt ngay trên giọt màu xanh lactophenol, chú ý để băng được kéo dài hoàn hảo và bôi trơn bằng thuốc nhuộm. Tay cầm bằng bạch kim được tháo rất tinh vi.

- Nhỏ thêm một giọt màu xanh lactophenol lên băng và một chiếc kẹp bìa ở trên. Không ấn quá mạnh để không phá hủy cấu trúc của nấm, vì chúng rất dễ vỡ. Chất tạo màu phải được để trong khoảng 3 đến 4 phút.

- Sau thời gian này, chế phẩm sẵn sàng được quan sát dưới kính hiển vi ở độ phóng đại 10X hoặc 40X. Nếu cần quan sát 100X, nên sử dụng dầu ngâm.

- Các cấu trúc của nấm nói chung đều có màu xanh lam, ngoại trừ nấm chết sẽ giữ lại màu nâu đặc trưng của loại nấm này.

Nhuộm mẫu vật sinh học trực tiếp

Nếu cần nghiên cứu một mẫu sinh học trực tiếp, chẳng hạn như đờm, mủ, dịch tiết, chất tiết, và những mẫu khác, chúng cần phải có quy trình khử nhiễm mẫu trước đó. Dung dịch NaOH được sử dụng cho việc này.

Trong trường hợp mẫu tóc, chúng có thể được nhuộm trực tiếp.

Một số sợi lông bị ảnh hưởng (tổng cộng là 10 sợi) được lấy từ các tổn thương viêm mao mạch được cho là có lông (vùng rụng lông) và đặt trên một phiến kính (3 đến 4 sợi lông trên một phiến kính). Một vài giọt màu xanh lactophenol được đặt lên trên và ngay lập tức được phủ bằng một tấm bìa.

Dùng kẹp giữ tấm trượt và đốt nóng nhẹ trên đầu đốt. Để làm điều này, hãy thực hiện nhanh chóng từ 3 đến 4 lần hơ qua ngọn lửa. Quan sát kính hiển vi ở 40X và tìm các bào tử bên ngoài hoặc bên trong lông (ectothrix hoặc endothrix tương ứng). Nếu cần, thêm dầu ngâm và quan sát ở 100X.

Nhuộm ống mầm trong việc xác định

Sau khi ủ dịch vụ nuôi cấy Candida albicans giả định trong huyết thanh người từ 2 đến 4 giờ ở 37 ° C, một phần dung dịch được lấy và nhuộm màu xanh lam lactophenol. Việc chuẩn bị được quan sát dưới kính hiển vi ở 40X. Ống mầm hiện diện và các phôi bào nhuộm màu xanh lam sáng.

Bảng dữ liệu an toàn lactophenol

Hiệp hội Phòng cháy chữa cháy Quốc gia (NFPA), thiết lập bảng dữ liệu an toàn cho các chất hóa học về mức độ rủi ro mà nó thể hiện theo các khía cạnh khác nhau, chúng được biểu tượng bằng một hình thoi màu và một số khác nhau từ 0- Bốn.

Các mối nguy hiểm đối với sức khỏe được xác định bằng màu xanh lam, dễ bắt lửa bằng màu đỏ, tính không ổn định hoặc phản ứng có màu vàng và bất kỳ mối nguy hiểm đặc biệt nào có màu trắng.

Sức khỏe

Nguy cơ đối với sức khỏe do lactophenol blue theo NFPA là cấp độ 3. Điều này có nghĩa là chất này cực kỳ nguy hiểm khi ăn phải hoặc tiếp xúc trực tiếp với da hoặc niêm mạc.

Nó là một chất có tính ăn mòn cao và gây kích ứng.

Khi tiếp xúc với da và niêm mạc, nó gây bỏng nặng.

Nếu ăn phải nó có thể gây nhức đầu, lú lẫn, hôn mê, bất tỉnh, ngừng hô hấp và thậm chí tử vong.

Tính dễ cháy

Theo NFPA, Lactophenol Blue được xếp hạng Cấp độ 1 về tính dễ cháy. Điều này có nghĩa là nó chỉ cháy nếu được làm nóng trên 94 ° C.

Không ổn định

Được liệt kê theo NFPA ở mức 0 (không) về khả năng phản ứng. Điều này có nghĩa là nó không có nguy cơ phản ứng, tức là nó là một chất ổn định về mặt hóa học.

Mối nguy hiểm đặc biệt

Nó không cung cấp thêm các nguy cơ đặc biệt.

Người giới thiệu

1. Phòng thí nghiệm SAR. Màu xanh lactophenol. 2010. Có tại: labsar.com.
2. Phòng thí nghiệm hóa học lâm sàng ứng dụng. Màu xanh lam lactophenol. 2015. Có sẵn tại: cromakit.es
3. Phòng thí nghiệm Merck. Kính hiển vi màu xanh lam lactophenol trong dung dịch. 2017. Có sẵn tại: Users / Equipo / Downloads
4. Thẻ khẩn cấp. Dung dịch màu xanh lam lactophenol để nhuộm nấm. Universidad Pontificia Javeriana, Bogotá Colombia. 2014. Có tại: javeriana.edu.co
5. González M, Diamont D, Gutiérrez B. Kỹ thuật nhuộm cấu trúc nấm bằng thuốc nhuộm thực vật như một giải pháp thay thế không gây ô nhiễm. Bioagro, 2011; 23 (1): 65-68. Có sẵn tại: Redalyc.
6. Phòng thí nghiệm Himedia. Màu xanh bông Lactophenol. 2017. Có sẵn từ: himedialabs.com
7. Wanger A, Chavez V, Huang R, Wahed A, Actor J, Dasgupta A. Các xét nghiệm hóa sinh và kỹ thuật nhuộm để xác định vi sinh vật. Khoa học trực tiếp, 2017; 61-73. Có sẵn từ: Elsevier