Các xét nghiệm phân là một nghiên cứu trong phòng thí nghiệm, trong đó phân (phân) được kiểm tra để phát hiện ký sinh trùng đường ruột. Đây là một trong những kỹ thuật phòng thí nghiệm đơn giản nhất và lâu đời nhất, được Anton Van Leeuwenhoek phát triển ban đầu vào thế kỷ 18.
Anton Van Leeuwenhoek, được coi là cha đẻ của ngành vi sinh vật học, đã sử dụng phương pháp soi cầu trực tiếp "trực tiếp" để quan sát phân của chính mình và mô tả những gì nhiều năm sau đó được xác định là sinh vật nguyên sinh của Giardia lamblia, một sinh vật đơn bào xâm nhập vào ruột non của con người.
Ascaris lumbricoides dạng trưởng thành (Nguồn: Wikimedia Commons)
Các bệnh ký sinh trùng ảnh hưởng đến hàng triệu người trên thế giới, đặc biệt là ở các nước nghèo hoặc kém phát triển, nơi có điều kiện vệ sinh kém liên quan đến việc thải phân và sử dụng nước bị ô nhiễm.
Việc chẩn đoán các bệnh này là rất quan trọng để có một phương pháp điều trị thích hợp, vì xét nghiệm soi đáy mắt là một công cụ không thể thiếu đối với nó. Đây là một thử nghiệm trong phòng thí nghiệm đơn giản, nhanh chóng và không tốn kém.
Xét nghiệm phân bao gồm một số kỹ thuật, ngoài việc cho phép hình dung trực tiếp và định lượng trứng, vi khuẩn sinh dưỡng, u nang hoặc ấu trùng, cho phép xác định cấu trúc của vi sinh vật và do đó xác định ký sinh trùng.
Các kỹ thuật được sử dụng để kiểm tra nội soi đồng tử bao gồm kỹ thuật nhuộm xanh methylen, phương pháp cô đặc, kỹ thuật Faust, Richie, kỹ thuật lắng và kiểm tra trực tiếp, đơn lẻ hoặc nối tiếp.
Trứng chưa thụ tinh của Ascaris lumbricoides. (Nguồn: Trung tâm Kiểm soát và Phòng ngừa Dịch bệnh, qua Wikimedia Commons).
Lấy mẫu
Để thực hiện nghiên cứu này, bệnh nhân được yêu cầu lấy mẫu phân tươi không bị dính nước tiểu, nước, máu (kinh nguyệt) hoặc đất. Mẫu phải có kích thước bằng quả óc chó hoặc nếu ở dạng lỏng thì ít nhất phải có thể tích tương ứng với hai muỗng canh.
Bệnh nhân không được dùng thuốc diệt ký sinh trùng ít nhất ba ngày trước khi lấy mẫu hoặc trong thời gian do bác sĩ chỉ định. Bạn cũng không nên sử dụng thuốc nhuận tràng.
Các mẫu phải được đặt trong một hộp đựng khô, miệng rộng, có nắp đậy hoặc hộp đựng dùng một lần được thiết kế đặc biệt (có sẵn tại nhà thuốc ưu tiên của bạn). Mẫu phải được đặt trong môi trường mát mẻ, không được để trong tủ lạnh quá 24 giờ và không được bảo quản gần nguồn nhiệt hoặc nơi đông lạnh.
Khi kiểm tra theo chỉ định là nối tiếp, ít nhất ba mẫu được yêu cầu, phải lấy mỗi 24 giờ hoặc hơn, theo chỉ định của bác sĩ. Đối với những trường hợp này, các phòng thí nghiệm thường cung cấp một bộ bình chứa các dung dịch có chất bảo quản.
Khi bệnh nhân quan sát thấy một số “con giun” trong phân, nếu có thể, anh ta nên cho vào chai đậy kín có nước và mang đến phòng thí nghiệm cùng với chai mẫu phân.
Các lọ có mẫu hoặc có "giun" phải được dán nhãn và xác định tên bệnh nhân, tuổi, giới tính và ngày giờ lấy mẫu.
Điều rất quan trọng là phải hướng dẫn đầy đủ cho bệnh nhân về tất cả các khía cạnh của việc lấy và xử lý mẫu, vì nó phụ thuộc vào việc liệu các yếu tố có thể tồn tại trong mẫu đó có còn khả thi để quan sát, xác định và chẩn đoán hay không.
Kỹ thuật
Có các kiểm tra trực tiếp bằng kính đồng cận và kỹ thuật huyền phù và cô đặc của các mẫu được sử dụng nhiều lần để tránh âm tính giả và quan sát các mẫu sạch hơn nhiều. Một số kỹ thuật nhuộm cũng được sử dụng để xác định một số ký sinh trùng nhất định.
Kỳ thi trực tiếp
Xét nghiệm phân trực tiếp, sử dụng kỹ thuật nhỏ giọt đang chờ xử lý, bao gồm pha loãng mẫu phân với dung dịch sinh lý (0,9% NaCl) và đặt một giọt dung dịch này vào một ổ chứa có một phiến kính chuyên dụng. cho kết thúc đó.
Khi giọt được đặt trên phiến kính, nó được phủ bằng một tấm bìa và quan sát dưới kính hiển vi. Kỹ thuật này cho phép chúng ta quan sát trứng và u nang, nhưng nó cũng cho phép chúng ta quan sát bất kỳ yếu tố di động nào như trùng roi, ấu trùng, vi khuẩn sinh dưỡng, ciliates, v.v.
Kỹ thuật đình chỉ và tập trung
Kỹ thuật huyền phù sử dụng một dung dịch đậm đặc hơn các phần tử cần quan sát, để những phần tử này nổi trên bề mặt chất lỏng và có thể được thu lại, vì chúng vẫn tập trung ở lớp bề mặt của dung dịch.
Kỹ thuật này có ưu điểm là nó cho phép có một mẫu mảnh vụn khá sạch, vì những mảnh vụn này, dày đặc hơn, vẫn ở dưới đáy chai. Nhược điểm tương đối là dung dịch co lại và làm biến dạng vi sinh vật trong thời gian ngắn.
Những phương pháp này không được sử dụng cho trứng giun sán và cestode vì chúng rất nặng và không nổi trong các dung dịch này. Chúng được sử dụng rộng rãi để quan sát động vật nguyên sinh ở dạng tropozoic hoặc trứng của chúng và để quan sát các ấu trùng như giun lươn (Strongyloides stercoralis).
Một kỹ thuật khác được sử dụng rộng rãi vì không làm biến dạng vi sinh vật trong mẫu và đơn giản, rẻ tiền là kỹ thuật lắng bằng formalin.
Ví dụ về kỹ thuật tập trung bao gồm kỹ thuật của Faust và Richie.
Các kỹ thuật khác nhau cho phép quan sát bằng kính hiển vi của trứng, ấu trùng hoặc các yếu tố khác của các ký sinh trùng đường ruột khác nhau, kết hợp với kỹ thuật nhuộm, cho phép xác định và chẩn đoán các bệnh này.
Ví dụ
Tiếp theo, một ca lâm sàng được mô tả và đưa ra một số hình ảnh minh họa tính hữu ích của việc xét nghiệm phân để chẩn đoán và đánh giá lợi ích của việc điều trị.
Trứng trichuria trichuris (Nguồn: CDC / Tiến sĩ Mae Melvin, Được phép: Thư viện Hình ảnh Y tế Công cộng qua Wikimedia Commons)
Nam bệnh nhân 18 tuổi đến khám vì đau bụng quặn từng cơn, dữ dội hơn ở vùng hậu môn, buồn nôn và đi ngoài phân lỏng.
Khi hỏi bệnh nhân, bác sĩ ghi nhận hai điểm nổi bật: 1) bệnh nhân cho biết đã tắm ở một hồ nước ở vùng nông thôn và 2) anh ta rất bức xúc khi thấy phân nổi trong bồn cầu. Sau khi kiểm tra bệnh nhân, bác sĩ nghi ngờ sự hiện diện của Giardia lamblia.
Vòng đời của Giardia lamblia (Nguồn: LadyofHats qua Wikimedia Commons)
Động vật nguyên sinh này nằm trong ruột non của con người và cản trở sự hấp thụ chất béo, tạo ra phân rất nhờn và có xu hướng nổi. Ô nhiễm thường xảy ra do nước bị ô nhiễm trong các hồ hoặc suối ở các vùng nông thôn hoặc trong các hồ bơi hoặc bồn tắm nước nóng được bảo dưỡng kém.
Giardia lamblia trophozoites (Nguồn: Ảnh của Eva Nohýnková, Khoa Y học Nhiệt đới, Khoa Y 1, Đại học Charles ở Praha và Bệnh viện Bulovka, Cộng hòa Séc. Hình ảnh trong bài báo của Marie Lipoldova, Phòng thí nghiệm Miễn dịch học Phân tử và Tế bào, Viện Phân tử Di truyền học, Viện Hàn lâm Khoa học Cộng hòa Séc, Praha, Cộng hòa Séc qua Wikimedia Commons)
Bác sĩ yêu cầu kiểm tra phân và kết quả xác nhận sự hiện diện của Giardia lamblia. Sau khi kết thúc đợt điều trị, một cuộc kiểm tra phân khác được chỉ định để xác nhận không có u nang hoặc vi khuẩn sinh dưỡng Giardia lamblia.
Người giới thiệu
- Buonfrate, D., Mena, MA, Angheben, A., Requena-Mendez, A., Muñoz, J., Gobbi, F.,… & Nhóm Nghiên cứu Dự án COHEMI. (2015). Tỷ lệ nhiễm giun lươn ở Châu Mỹ Latinh: một tổng quan tài liệu có hệ thống. Dịch tễ học & Nhiễm trùng, 143 (3), 452-460.
- bởi Haro Arteaga, I. & Ruiz, AEC (2014). Chẩn đoán của. Ký sinh trùng y học (4a, 347.
- Mendoza, D., Nunez, FA, Escobedo, AA, Pelayo, L., Fernandez, M., Torres, D., & Cordovi, RA (2003). Tính hữu dụng của 2 phương pháp đồng cấu tử và việc sử dụng chúng trong một thử nghiệm trị liệu kháng tim. Tạp chí Y học Nhiệt đới Cuba, 55 (3), 174-178.
- Giá, -DL (2017). Sổ tay quy trình chẩn đoán ký sinh trùng đường ruột. CRC Nhấn.
- Sahin, I., Kiliç, H., Ozca, M., & Orhan, R. (1984). Một nghiên cứu đồng ký sinh trên các đô vật của đội tuyển quốc gia. Mikrobiyoloji bülteni, 18 (2), 114-118.