CONGO RED: ĐẶC ĐIỂM, CÁCH PHA CHẾ VÀ ỨNG DỤNG - SINH HỌC - 2025

Các Congo đỏ là một loại thuốc nhuộm azo cho protein được hình thành bằng cách kết hợp một muối diazonium và một vòng thơm hoạt động. Chất này có khả năng hấp thụ bức xạ điện từ trong quang phổ khả kiến, đó là lý do tại sao nó có màu sắc đậm.

Nó được tích điện âm. Do đó, nó có ái lực với các thành phần tế bào tích điện dương, chẳng hạn như một số chất protein. Màu sắc của nó thay đổi theo độ pH. Theo nghĩa này, nếu môi trường có tính axit (<hơn pH3), màu có màu xanh lam đậm. Giữa pH3 - pH 5,2 thì màu hoa vân anh (vùng chuyển màu), và với độ pH> 5,2 thì màu đỏ đậm.

Congo Red khử nước và dung dịch keo Congo Red. Nguồn: Pixinio.com và Wikipedia.com

Nó là một chất rất linh hoạt, vì nó có nhiều công dụng. Nó đã được sử dụng như một chất tạo màu trong ngành công nghiệp dệt may, cũng như cho các tế bào và vải.

Cũng để làm môi trường nuôi cấy đo lường hoạt động của enzym, như một chất chỉ thị pH, như một chất kiểm soát trong việc đánh giá hoạt động thích hợp của máy quang phổ, trong nghiên cứu sự hình thành màng sinh học, hoặc trong chẩn đoán amyloid.

Tương tự như vậy, người ta có thể phân biệt các typ huyết thanh vi khuẩn và nấm bằng cách xác định các cấu trúc cụ thể trong thành của chúng (lipopolysaccharides).

Đặc điểm của Congo đỏ

Chất này được Böttiger phát hiện vào năm 1884. Nó là một dẫn xuất diazonium được tạo thành bởi axit bis-diazoic của benzidine với axit naphthionic. Phân tử màu đỏ Congo đo bằng 21 Armstrong và trọng lượng phân tử là khoảng 8000 g / mol.

Congo đỏ có đặc điểm là dễ hòa tan trong nước, và thậm chí còn hòa tan trong dung môi hữu cơ như etanol, tạo thành dung dịch keo.

Nó có ái lực với cellulose, với mô amyloid và với các thành phần tế bào tích điện dương.

Sự chuẩn bị

Congo Red được pha chế với các nồng độ khác nhau tùy thuộc vào kỹ thuật được sử dụng. Hầu hết sử dụng màu đỏ Congo với tỷ lệ 1%, 2%, 0,1%, trong số những loại khác.

Ví dụ, để pha màu đỏ Congo 2%, cần cân 2 g màu thực phẩm khử nước và thêm 100 ml nước cất. Sau đó nó được giữ trong một chai màu hổ phách.

Các ứng dụng

Là chất tạo màu trong ngành dệt may

Trong một thời gian, nó đã được sử dụng rộng rãi trong ngành công nghiệp dệt may do tính cố định của nó trên bông, nhưng hiện tại nó không được sử dụng vì nó gây ung thư và cũng vì màu sắc không ổn định, bị biến màu do ma sát.

Xác định khả năng hình thành màng sinh học

Khả năng hình thành màng sinh học của vi sinh vật đã được chứng minh là một yếu tố độc lực.

Theo nghĩa này, thuốc nhuộm màu đỏ Congo được sử dụng như một phương pháp để xác định sự hình thành màng sinh học. Màu đỏ Congo liên kết với các exopolysaccharid có trong màng sinh học. Tuy nhiên, so với các phương pháp khác, nó ít được khuyến khích nhất do có âm tính giả cao xảy ra.

Phương pháp này sử dụng thạch đỏ Congo, nó bao gồm thạch máu làm cơ sở, glucose (10 g / l) và thuốc nhuộm đỏ Congo (0,4 g / l). Các chủng được đánh giá được gieo vào môi trường và ủ trong 24 giờ ở 37 ° C, và sau đó được ủ trong 48 giờ ở nhiệt độ phòng.

Chứng tỏ là kết quả dương tính nếu quan sát thấy các khuẩn lạc kết tinh có màu đen và khô.

Kiểm tra chất lượng máy quang phổ

Để đánh giá xem thiết bị đo độ hấp thụ hoặc giao dịch có tuân thủ các thông số đo quang theo quy định quốc tế hay không, một kỹ thuật đơn giản có thể được sử dụng để xác định xem thiết bị có phát ra kết quả trong phạm vi chấp nhận được hay không.

Một trong những kỹ thuật đánh giá là sử dụng màu đỏ Congo, dựa trên điểm isosbestic.

Điểm đẳng tích là bước sóng mà tại đó màu đỏ Congo phát ra cùng độ hấp thụ độc lập với pH, nồng độ và nhiệt độ. Giá trị độ hấp thụ là cố định và có thể được sử dụng làm tham chiếu.

Điểm đẳng quang lý thuyết của màu đỏ Congo được biết là 541 nm. Nếu giá trị thu được là khác nhau, tức là thiết bị có vấn đề về độ lệch bước sóng, cần được kỹ thuật viên chuyên ngành kiểm tra.

Chuẩn bị môi trường nuôi cấy

Ortiz và cộng sự mô tả một môi trường nuôi cấy được chuẩn bị với thuốc nhuộm đỏ Congo và carboxymethylcellulose gọi là CMC agar, để phát hiện các chủng vi sinh cellulite; nghĩa là, các nhà sản xuất cellulase (endogluconeses, exoglucanases và ß-glucosidase).

Môi trường này có một màu sắc mạnh mẽ. Màu sẽ bị tiêu biến do tác động của enzyme endoglucanase phá vỡ cấu trúc của carboxymethylcellulose. Điều này cho thấy một phản ứng tích cực.

Sự giảm độ nhớt và độ hấp thụ cho phép định lượng hoạt tính của enzym. Ví dụ, ở các chủng vi khuẩn Streptomyces sp.

Xác định vi sinh vật

Congo red có ái lực với cấu trúc polysaccharide của một số chủng nhất định, do đó đạt được sự nhận dạng của các vi sinh vật này. Trong số đó có Escherichia coli, và Shigella flexneri.

Các đĩa thạch đỏ Congo cũng được sử dụng để thu được các khuẩn lạc đặc trưng, ​​như trường hợp của Azospirillum sp, tạo ra các khuẩn lạc màu đỏ tươi, trong số các khuẩn lạc khác.

Vết tế bào và mô

Một trong những ứng dụng phổ biến nhất của Congo đỏ là tính hữu ích của nó trong việc chẩn đoán bệnh amyloidosis. Căn bệnh kỳ lạ này bao gồm sự tích tụ ngoại bào của một loại protein bất thường trong các cơ quan khác nhau. Protein bất thường này được tạo ra trong tủy xương và được gọi là amyloid.

Màu đỏ Congo có ái lực cao với chất này. Tính chất này đã được sử dụng để thể hiện sự hiện diện của nó trong các phần mô mô học. Congo Red được sử dụng cùng với Hematoxylin / Eosin cho mục đích này.

Sự liên kết của mô amyloid và màu đỏ Congo xảy ra thông qua các liên kết hydro không phân cực, giữa các nhóm cacboxyl và nhóm amin. Protein amyloid cung cấp nhóm cacboxyl (COOH) và nhóm amin màu đỏ Congo.

Mô amyloid có nhiều màu khác nhau, từ hồng đến đỏ đậm khi nhìn dưới kính hiển vi ánh sáng. Trong kính hiển vi với ánh sáng phân cực kép, những chế phẩm này được quan sát bằng một chất lưỡng chiết màu xanh lá cây táo bệnh lý.

Đó là, chúng biểu hiện lưỡng sắc, vì các sợi amyeloid là dị hướng. Quan sát này xác nhận chẩn đoán.

Nhuộm mô bằng màu đỏ Congo tương thích với các phương pháp chẩn đoán khác, chẳng hạn như phương pháp hóa tế bào miễn dịch, và thậm chí có thể được nhuộm lại màu.

Như một chất chỉ thị pH

Đặc tính chống lại sự thay đổi của pH được sử dụng bởi kỹ thuật gọi là nội soi sắc tố.

Kỹ thuật này sử dụng chất tạo màu và chỉ thị pH cho phép phát hiện một số bệnh lý. Trong số đó có việc sử dụng màu đỏ Congo, có thể phát hiện ra các ổ ung thư sớm ở niêm mạc dạ dày, được sử dụng như một dấu hiệu của nồng độ axit.

Kỹ thuật này dựa trên thực tế là màu đỏ Congo ở pH axit có màu đen. Vì vậy, sau khi nhỏ dung dịch Congo đỏ lên niêm mạc dạ dày, những nơi có nhợt nhạt sẽ được chọn để lấy mẫu làm sinh thiết, tức là những nơi không tiết acid. Điều này cho thấy sự hiện diện của một tiêu điểm ung thư hoặc mất các tế bào thành.

Người giới thiệu

1. "Congo Red." Wikipedia, Bách khoa toàn thư miễn phí. Ngày 8 tháng 5 năm 2019, 12:13 giờ UTC. Ngày 16 tháng 5 năm 2019, 04:08, es.wikipedia.org.
2. Ortiz M, Uribe D. Phương pháp mới để định lượng hoạt tính endoglucanase dựa trên phức chất đỏ cellulose-Congo. Orinoquia. 2011 tháng sáu; 15 (1): 7-15. Có sẵn từ: scielo.org.
3. Peña J, Uffo O. Sản xuất màng sinh học trong các kiểu gen của Staphylococcus aureus được phân lập từ bệnh viêm vú bò ở Cuba. Rev Salud Anim. . 2013 Tháng 12; 35 (3): 189-196. Có sẵn tại: scielo.s
4. Fich F, Chahuán M, Farías M, Cárdenas C, Abarzúa A, Araya G et al. Biểu hiện da của bệnh amyloidosis toàn thân như một chìa khóa chẩn đoán: Trường hợp lâm sàng. Bác sĩ. Chile. 2012 Tháng 4; 140 (4): 499-502. Có sẵn trong: scielo.
5. Duymovich C, Acheme R, Sesini S, Mazziotta D. Máy quang phổ và Máy đo quang Hướng dẫn cập nhật thực tế. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana 2005, 39 (tháng 9-12): Có tại: redalyc.org
6. Marín J, Díaz J và Solís J. Nội soi nhiễm sắc thể khi nhiễm vi khuẩn Helicobacter pylori: đã đến lúc phản ứng chưa? Rev Esp Enferm Dig 2012; 104 (1): 1-3
7. Fieser L, Fieser M. 1985. Hóa học hữu cơ. Biên tập Reverté. Barcelona, ​​Tây Ban Nha. Có tại: books.google.co.ve
8. Murillo M. Kỹ thuật nhuộm mô mô học. Đại học Guadalajara, Mexico. Có tại: academia.edu
9. Paillié M. Xác định hoạt tính phân giải xenlulo, ligninolytic và amylolytic của Actinobacteria được phân lập từ đất thân rễ của cỏ ba lá trắng (Trifolium repeatns). 2012. Pontificia Universidad Javeriana Khoa Khoa học Vi sinh Công nghiệp Bogotá DC Có tại: repository.javeriana.edu.co
10. Cárdenas, D, Garrido M, Bonilla R, & Baldani V. Phân lập và xác định Azospirillum sp. trên cỏ Guinea (Panicum max Jacq.) từ Thung lũng Cesar. Đồng cỏ và chim ăn thịt, 2010; 33 (3): 1-8 Có trong: scielo.