- Nó dùng để làm gì?
- Nền tảng
- Theo tuổi của bệnh nhân
- Theo loại vi sinh vật
- Quá trình
- Khuyến nghị lấy mẫu
- Số lượng mẫu
- Lấy mẫu
- Vô trùng trước khi lấy mẫu
- Chiết xuất mẫu
- Văn hóa
- Các kết quả
- Cách nhận biết cấy máu dương tính hay nhiễm bẩn
- Người giới thiệu
Các nền văn hóa máu là một xét nghiệm vi khuẩn học đang tìm cách để phát hiện sự hiện diện của vi sinh vật trong máu. Máu là một chất lỏng vô trùng về bản chất và do đó phải được giữ trong điều kiện sinh lý, vì vậy sự hiện diện của vi khuẩn hoặc nấm trong máu luôn là bệnh lý.
Khi vi khuẩn hoặc nấm được tìm thấy trong máu, nhưng sự nhân lên không vượt quá sự loại bỏ vi sinh vật bởi hệ thống miễn dịch, nó được gọi là nhiễm khuẩn huyết (đối với vi khuẩn) hoặc nấm huyết (đối với nấm); Nhưng nếu vi sinh vật tăng số lượng không kiểm soát được thì được gọi là nhiễm trùng huyết.

Chai cấy máu (màu vàng: bệnh aerobiosis trẻ em, màu xanh lá cây: bệnh aerobiosis ở người lớn và màu đỏ: bệnh yếm khí ở người lớn). Nguồn: ảnh do tác giả ThS Marielsa Gil chụp.
Nhiễm trùng huyết, nhiễm trùng huyết và nhiễm trùng huyết gây nguy hiểm đến tính mạng của bệnh nhân và do đó phải được điều trị ngay lập tức. Đó là lý do tại sao khi nghi ngờ có nhiễm trùng trong máu, các bác sĩ yêu cầu xét nghiệm cấy máu.
Phân tích vi khuẩn này cho phép biết có hay không có nhiễm trùng trong máu và vi sinh vật nào có liên quan. Ngoài ra, nếu dương tính, xét nghiệm độ nhạy sẽ được thực hiện để biết loại kháng sinh hoặc thuốc kháng nấm nào có thể được sử dụng trong điều trị.
Ngược lại, nếu kết quả cấy máu âm tính trong 24 giờ ủ bệnh thì không nên loại bỏ mẫu máu này cho đến khi âm tính trong 240 giờ. Điều này đảm bảo rằng không có vi sinh vật phát triển chậm.
Để việc cấy máu đáng tin cậy, phải áp dụng các biện pháp vô trùng cực độ khi lấy mẫu, và để tăng độ tin cậy và độ nhạy của xét nghiệm, ít nhất hai mẫu phải được lấy trong hoặc gần đỉnh sốt.
Nó dùng để làm gì?
Máu là một chất lỏng vô trùng và khi tìm thấy vi sinh vật trong đó thì 100% là bệnh lý. Tình trạng này đại diện cho một hình ảnh lâm sàng rất tinh vi làm tổn hại đến tính mạng của bệnh nhân.
Cấy máu là một xét nghiệm vi khuẩn học quan trọng để phát hiện sự hiện diện của vi sinh vật trong máu.
Các vi sinh vật có thể đến máu thông qua các con đường khác nhau, có thể là nhiễm trùng ngoài mạch như: viêm phổi, nhiễm trùng trong ổ bụng, viêm bể thận, nhiễm trùng nghiêm trọng da, mô mềm hoặc viêm khớp, trong số những bệnh khác.
Hoặc nó cũng có thể được tiêm tĩnh mạch, ví dụ, nhiễm bẩn ống thông tĩnh mạch hoặc động mạch, viêm nội tâm mạc, nghiện ma túy qua đường tĩnh mạch, sử dụng thuốc hoặc dung dịch bị nhiễm bẩn, v.v.
Việc phát hiện và điều trị kịp thời tác nhân gây nhiễm trùng huyết là điều cần thiết để đảm bảo sự sống còn của bệnh nhân.
Theo nghĩa này, bác sĩ nên chỉ định việc cấy máu khi quan sát thấy các dấu hiệu và triệu chứng gợi ý nhiễm trùng huyết, chẳng hạn như: sốt (trên 38 ° C) mà không có tiêu điểm nhiễm trùng rõ ràng hoặc ngược lại, hạ thân nhiệt (<de 36 ° C).
Các dấu hiệu khác có thể là: ớn lạnh, tăng số lượng bạch cầu (> 10.000 tế bào / mm 3 ) hoặc giảm đáng kể số lượng bạch cầu đa nhân (<1.000 PMN / mm 3 ). Cũng như suy giảm đa cơ quan hoặc mất sức sống đột ngột, trong số các dấu hiệu cảnh báo khác.
Nhiễm khuẩn huyết có thể liên tục, thoáng qua hoặc không liên tục. Điều này rất quan trọng đối với việc lấy mẫu, vì cần phải lấy khi xác suất tìm thấy vi sinh vật lưu hành cao hơn.
Do đó nên lấy ít nhất 2 mẫu ở những nơi khác nhau. Ngoài ra, lý tưởng nhất là mẫu được lấy trong những lúc sốt cao điểm hoặc khi bệnh nhân có biểu hiện run rẩy, hạ thân nhiệt cực độ, đổ mồ hôi hoặc nhịp tim nhanh.
Tuy nhiên, để cấy máu trở thành một công cụ thực sự hữu ích, mẫu phải được thực hiện hết sức cẩn thận. Thao tác không tốt hoặc vô trùng không tốt tại thời điểm lấy mẫu có thể làm mất hiệu lực của xét nghiệm, dẫn đến kết quả dương tính giả.
Nền tảng
Nghiên cứu bao gồm việc lấy hai hoặc ba mẫu máu một cách vô trùng và đặt nó vào những chai đặc biệt.
Dụng cụ đặc biệt để nuôi cấy mẫu máu được gọi là bình cấy máu. Chúng được phân loại thành:
Theo tuổi của bệnh nhân
-Sử dụng cho trẻ em
-Danh cho ngươi lơn.
Theo loại vi sinh vật
-Flasks cho vi sinh vật hiếu khí (vi khuẩn hiếu khí, vi khuẩn biến đổi gen và nấm).
-Bình nuôi cấy vi sinh kỵ khí (vi khuẩn kỵ khí nghiêm ngặt).
Một số chứa môi trường nuôi cấy lỏng và một số chứa đồng thời môi trường nuôi cấy rắn và lỏng. Chúng cũng tồn tại với các hạt than hoạt tính.
Quá trình
Khuyến nghị lấy mẫu
- Mẫu được lấy bởi nhân viên được đào tạo và huấn luyện chuyên sâu về lĩnh vực vi sinh.
- Vô trùng hoặc vệ sinh kỹ lưỡng nơi lấy mẫu chắc chắn là bước quan trọng nhất.
- Giống như tất cả các lần lấy mẫu, nhân viên y tế phải tuân thủ đầy đủ các biện pháp an toàn sinh học trong quá trình này (sử dụng găng tay, áo choàng, kính, và các biện pháp khác).
- Chú ý luôn có sẵn các dụng cụ cần thiết để lấy mẫu.
- Ghi nhãn đầy đủ của bệnh nhân, ngày tháng, số bệnh án, thời gian lấy mẫu, số thứ tự xét nghiệm.
-Lý tưởng là lấy mẫu trước khi bệnh nhân bắt đầu điều trị bằng kháng sinh. Nó chỉ được chỉ định trong trường hợp nghi ngờ việc điều trị đang diễn ra không hoạt động. Trong trường hợp này, nên lấy mẫu trước khi thay thuốc, sử dụng các chai cấy máu có kháng sinh ức chế (hạt than hoạt tính).
- Phải lấy ít nhất 2 mẫu ở các vị trí giải phẫu khác nhau, chẳng hạn như cánh tay phải và cánh tay trái. Trong trường hợp nghi ngờ viêm nội tâm mạc, 3 mẫu được khuyến cáo. Hai chai sẽ được bao gồm trong mỗi mẫu (một cho khí sinh và một cho vi khuẩn kỵ khí).
Số lượng mẫu
Lượng mẫu thay đổi tùy theo độ tuổi của bệnh nhân, nhưng tỷ lệ 1: 5 đến 1:10 phải luôn được duy trì đối với độ pha loãng của máu / môi trường nuôi cấy.
Ở trẻ sơ sinh, lượng mẫu được khuyến nghị là 1 ml máu cho mỗi lọ. Bình dành cho trẻ em được sử dụng.
Trong trường hợp trẻ sơ sinh từ một tháng đến một tuổi, có thể tăng lên 1,5 ml máu mỗi bình. Bình dành cho trẻ em được sử dụng.
Ở trẻ em trên 2 tuổi, lượng mẫu thích hợp là 2,5 ml máu mỗi lọ. Bình dành cho trẻ em được sử dụng.
Từ tuổi thiếu niên, nó có thể được tăng lên đến thể tích máu từ 5 - 10 ml mỗi chai. Một chai dành cho người lớn được sử dụng.
Cuối cùng, ở giai đoạn trưởng thành, lượng cần thiết là 8-10 ml mỗi chai. Một chai dành cho người lớn được sử dụng.
Lấy mẫu
- Mẫu máu có thể là tĩnh mạch hoặc động mạch. Tuy nhiên, máu động mạch chỉ được lấy khi không thể lấy mẫu tĩnh mạch.
- Không nên lấy mẫu từ ống thông tĩnh mạch trung tâm trừ khi:
- Không thể lấy mẫu theo đường ngoại vi (tĩnh mạch hoặc động mạch).
- Bệnh nhân có nguy cơ chảy máu.
- Khi bác sĩ nghi ngờ nhiễm khuẩn huyết do nhiễm bẩn ống thông tĩnh mạch trung tâm.
- Khi sốt xuất hiện trở lại sau khi hết sốt từ 4 đến 5 ngày, bất kể bệnh nhân có điều trị kháng sinh đồ hay không.
Vô trùng trước khi lấy mẫu
- Chọn các vị trí giải phẫu để lấy mẫu. Nói chung, các tĩnh mạch có kích thước tốt nhất được chọn (tĩnh mạch húng quế hoặc cephalic).
- Theo Trung tâm Kiểm soát Dịch bệnh (CDC) ở Atlanta (Mỹ), người thực hiện phải rửa tay bằng chlorhexidine 2% hoặc povidone iodine 10% trước khi lấy mẫu, ngoài ra phải đeo găng tay.
-Chuẩn bị và xác định vị trí tĩnh mạch sẽ sử dụng.
- Làm sạch vùng chọc theo cách xoay tròn, thực hiện các chuyển động từ trung tâm ra ngoài bằng cách sử dụng xà phòng chlorhexidine hoặc xà phòng sát trùng. Rửa sạch bằng nước muối vô trùng.
Sau đó, bôi thuốc sát trùng và để nó tự hoạt động. Ví dụ chlorhexidine gluconate 0,5% trong 1 phút hoặc povidone iodine 10% trong 2 phút. Đối với trường hợp thứ hai, trước tiên hãy hỏi bệnh nhân có bị dị ứng với iốt hay không. Nếu dị ứng có thể thay cồn 70%.
Chiết xuất mẫu
- Đặt garô để máu chảy ra ngoài và làm nảy mầm tĩnh mạch.
- Không chạm ngón tay vào vị trí thủng lại. Nếu điều này là thực sự cần thiết, ngón tay nên được rửa theo cách tương tự như vùng đâm thủng.
-Chèn kim tiêm hoặc da đầu vào tĩnh mạch và trích ra lượng máu cần thiết.
-Không được để bông, gạc lên kim khi lấy ra nếu nó không được vô trùng.
- Tháo niêm phong an ninh khỏi chai rất cẩn thận và không chạm vào nắp. Một số tác giả khuyến nghị thực hiện khử trùng nắp trước khi cấy mẫu.
- Phân phối lượng máu thích hợp vào các lọ. Nếu mẫu được lấy bằng kim phun, thì lượng cần thiết đầu tiên được đổ vào bình kỵ khí và sau đó vào bình hiếu khí. Nếu việc lấy được thực hiện với da đầu (bướm), nó được đổ theo cách ngược lại.
- Trộn nhẹ chai cấy máu bằng cách đảo ngược.
- Đổi găng tay và lặp lại các bước trước đó cho lần lấy mẫu thứ hai.
-Nếu lấy mẫu thứ hai ở địa điểm khác thì có thể làm ngay, nhưng nếu lấy ở cùng địa điểm thì phải đợi từ 30 đến 90 phút giữa mẫu này với mẫu khác.
- Mẫu phải được đưa đến phòng thí nghiệm càng sớm càng tốt, nếu không được thì phải để ở nhiệt độ phòng đến 18 giờ.
Văn hóa
Khi ở trong phòng thí nghiệm, các bình được ủ ở 37 ° C trong các điều kiện của mỗi bình, nghĩa là, tương ứng với khí sinh học và vi khuẩn kỵ khí.
Theo phương pháp thủ công, đổ chuông nên được bắt đầu sau 24 giờ ủ và sau đó đổ chuông liên tục hàng ngày. Các vòng được thực hiện như sau: đầu tiên nắp chai được khử trùng và kim của một vòi phun vô trùng được đưa vào. Chất lỏng được chiết ra từ bình và gieo trên thạch máu và thạch sô cô la.
Nếu có sự phát triển, Gram được thực hiện, cấy con trong môi trường cụ thể, xét nghiệm sinh hóa và kháng sinh đồ.
Trong các phương pháp tự động, thiết bị Bact / Alert sẽ phát ra cảnh báo khi phát hiện thấy một lọ là dương tính. Theo cách tương tự, nó nên được gõ vào thạch máu và thạch sô cô la.
Một phương pháp khác đang được quan tâm là phân tích bình sau 6 giờ ủ bằng phương pháp khối phổ. Phương pháp này đã giúp tăng độ nhạy và tốc độ chẩn đoán.
Các kết quả
Chỉ cần chai cấy máu âm tính, có thể đưa ra các báo cáo trung gian sơ bộ cho bác sĩ điều trị. Báo cáo chỉ ra rằng nó âm tính trong những giờ nó được ủ. Ví dụ: nếu nó âm cho đến ngày thứ tư, nó sẽ được báo cáo như sau:
Kết quả sơ bộ: nuôi cấy âm tính ở 96 giờ ủ.
Lưu ý: nghiên cứu tiếp tục trong 240 giờ.
Nếu kết quả cấy máu dương tính, bác sĩ điều trị sẽ được thông báo ngay lập tức và gửi báo cáo có ít nhất gam khuẩn lạc. Thí dụ:
Kết quả sơ bộ: trong nuôi cấy dương tính ở 48 giờ ủ bệnh, quan sát thấy trực khuẩn gram âm và oxidase âm tính. Quá trình xác định và kiểm tra độ nhạy đang được tiến hành.
Thông tin này hướng dẫn bác sĩ điều trị bắt đầu một liệu pháp theo kinh nghiệm đối với vi sinh vật có thể, trong khi chờ đợi kết quả cuối cùng của phòng thí nghiệm.
Sau khi hoàn thành nghiên cứu vi khuẩn học, tức là vi sinh vật đã được xác định và có sẵn đồ thị kháng sinh, báo cáo cuối cùng phải được gửi càng sớm càng tốt.
Cần đặc biệt cẩn thận nếu sinh vật đích là Neisseria gonorrhoeae hoặc Neisseria meningitidis, vì những vi khuẩn này bị ức chế khi có natri polyanethosulfonate (SPS) nồng độ cao.
Đó là lý do tại sao hợp chất này không được vượt quá 0,025% trong chai cấy máu.
Ngược lại, nếu lần đầu lấy mẫu cấy máu trong các ống Vacutainer thì các ống này có nồng độ SPS gây độc cho não mô cầu và cầu khuẩn nên phải chuyển máu trong vòng 1 giờ vào hệ thống nuôi cấy canh trường.
Cách nhận biết cấy máu dương tính hay nhiễm bẩn
Cấy máu được coi là bị ô nhiễm khi chỉ có một lọ cấy máu phát triển trong tổng số được lấy. Và sự nghi ngờ về sự ô nhiễm sẽ tăng lên nếu vi sinh vật phân lập được là một hệ vi sinh vật bình thường trên da: ví dụ: Staphylococcus coagulase âm tính, Propionibacterium spp, trong số những vi sinh vật khác.
Tuy nhiên, ở những bệnh nhân bị suy giảm miễn dịch, không được bỏ qua vi sinh vật nào, nhưng trong trường hợp này vi sinh vật nên xuất hiện trong một số mẫu.
Ngược lại, nếu độ nhạy cảm với kháng sinh của cùng một loại vi sinh vật phân lập ở hai mẫu khác nhau là như nhau thì nhiễm trùng là có thật.
Một đặc điểm khác là lượng vi khuẩn, vì cấy máu bị ô nhiễm phát triển muộn, trong khi nhiễm trùng thực sự ở những bệnh nhân không được điều trị thường dương tính ở 14 giờ ủ bệnh khi vi sinh vật không gây khó chịu.
Mặt khác, ở những bệnh nhân được điều trị bằng thuốc kháng sinh, vi sinh vật liên quan có thể mất thời gian để phát triển vì tải lượng rất thấp.
Sự xuất hiện của nhiều hơn một vi sinh vật có thể gợi ý sự ô nhiễm, nhưng nếu kết quả giống nhau được lặp lại trong nhiều lần chụp từ các vị trí khác nhau thì đó là có thật.
Người giới thiệu
- "Cây mau." Wikipedia, Bách khoa toàn thư miễn phí. 3 tháng 7 năm 2019, 17:28 giờ UTC. 14 tháng 7, 2019, 19:05 en.wikipedia.org
- Hervé B. Các công nghệ mới trong chẩn đoán vi sinh: tự động hóa và một số ứng dụng trong xác định và nghiên cứu tính nhạy cảm của vi sinh vật. Đức Cha Med. Clin. Số lượng. Năm 2015; 26 (6) 753-763. Có tại: reader.elsevier.com
- Villarroel P. Chương 20: Nhiễm trùng huyết và nguy cơ bệnh tim mạch. Sức khỏe tim mạch. trang 187-194. Có tại: fbbva.es
- Sánchez R, Rincón B, Cortés C, Fernández E, Peña S, Heras EM Nền văn hóa máu: Họ đã nói gì với bạn và bạn làm gì? Đau ốm quả cầu. 2012; 11 (26): 146-163. Có sẵn tại: scielo.isc
- Pardinas-Llergo M, Alarcón-Sotelo A, Ramírez-Angulo C, Rodríguez-Weber F, Díaz-Greene E. Xác suất thành công của việc cấy máu dương tính. Med. Interna Mex. Năm 2017; 33 (1): 28-40. Có tại: scielo.org
