- Thuốc nhuộm dùng trong nhuộm đơn giản
- 6 bước để nhuộm màu đơn giản
- Bước 1
- Quan sát
- Bước 2
- Quan sát
- Bước 3
- Bước 4
- Quan sát
- Bước 5
- Người giới thiệu
Các nhuộm đơn là một cách nhanh chóng thủ tục nhuộm và đơn giản trong đó một loại thuốc nhuộm duy nhất được sử dụng, vì vậy nó được gọi là đơn giản. Nó chủ yếu được sử dụng để xác định hình thái và tổ chức của các tế bào có trong mẫu.
Tế bào tự nhiên không có màu, vì vậy cần phải làm cho chúng có thể nhìn thấy được theo một cách nào đó khi nhìn dưới kính hiển vi.
Tế bào má người được nhuộm bằng phương pháp nhuộm xanh methylene đơn giản.
Điều quan trọng cần nhấn mạnh là thuốc nhuộm được sử dụng trong phương pháp nhuộm đơn giản phải có tính bazơ mang điện tích dương (cation), để chúng có thể liên kết tự nhiên với thành tế bào và tế bào chất.
Các cấu trúc tế bào này mang điện tích âm. Đây là lý do tại sao thuốc nhuộm tích điện dương bị hút vào các tế bào và liên kết với chúng một cách tự phát. Do đó, tất cả các tế bào có trong một mẫu thử được nhuộm màu nhanh chóng.
Thuốc nhuộm dùng trong nhuộm đơn giản
Có một số vết bẩn cơ bản có thể được sử dụng trong phòng thí nghiệm vi sinh. Được sử dụng nhiều nhất là:
- Xanh metylen.
- Pha lê tím.
- Khoáng vật hữu cơ.
- Vân vân cơ bản.
Tất cả các thuốc nhuộm này hoạt động tốt trên vi khuẩn vì chúng có các ion màu tích điện dương (cation) (tế bào sắc tố).
Thời gian nhuộm cho hầu hết các vết bẩn này tương đối ngắn. Chúng thường dao động từ 30 giây đến 2 phút, tùy thuộc vào ái lực của thuốc nhuộm.
Điều quan trọng cần nhớ là trước khi nhuộm mẫu bằng phương pháp nhuộm đơn giản, nó phải được kéo dài và cố định vào lam kính (lam); mẫu mở rộng và cố định được gọi là phết tế bào.
6 bước để nhuộm màu đơn giản
Bước 1
Đặt phiến kính lên giá nhuộm và bôi vết bẩn mong muốn. Để thời gian tương ứng hành động.
Thông thường, quá trình nhuộm đơn giản sẽ mất vài giây đến vài phút, tùy thuộc vào vết bẩn được sử dụng.
Quan sát
Trong bước này, điều quan trọng là không được vượt quá thời gian khuyến cáo cho thuốc nhuộm được sử dụng, vì các tinh thể có thể hình thành trên tờ giấy, tạo ra thứ được gọi là "hiện vật" làm sai lệch hình thái của tế bào.
Bước 2
Rửa kỹ vết bẩn trên phiến kính bằng nước cất từ chai, hoặc nước máy chảy từ từ cho đến khi nước chảy ra trong. Điều này thường mất 5-10 giây.
Quan sát
Không áp dụng dòng nước trực tiếp lên vết bẩn, để tránh lực tác động tương tự làm hỏng mẫu.
Nếu bạn không có nước cất, bạn có thể sử dụng nước máy mà không vấn đề gì vì nó sẽ không ảnh hưởng đến kết quả của màu nhuộm.
Bước 3
Dùng khăn giấy thấm nước thấm lên phiến kính theo một hướng và không chà xát. Đảm bảo mặt dưới của trang chiếu sạch sẽ.
Bước 4
Quan sát vết bẩn đã nhuộm dưới kính hiển vi. Bắt đầu với các mục tiêu xa nhất để định vị chính xác khu vực mà bạn muốn quan sát chi tiết hơn. Thay đổi vật kính để ngày càng gần mẫu hơn.
Quan sát
Để sử dụng vật kính có độ phóng đại cao hơn (thường là 100X), nên sử dụng dầu ngâm vì điều này giúp ánh sáng xuyên qua tốt hơn và hình ảnh sắc nét hơn. Không nhất thiết phải sử dụng bìa kẹp.
Bước 5
Cuối cùng, vứt bỏ tất cả các mẫu trong một thùng chứa thích hợp được dán nhãn "nguy hiểm sinh học".
Người giới thiệu
- (2001). Ứng dụng vi sinh: Sổ tay hướng dẫn phòng thí nghiệm trong vi sinh vật học nói chung (xuất bản lần thứ 8 ). Các công ty McGraw-Hill.
- Harisha, S. (2006). Giới thiệu về Công nghệ sinh học thực hành (1 st ). Phương tiện tường lửa.
- Moyes, RB, Reynolds, J., & Breakwell, DP (2009). Nhuộm vi khuẩn sơ bộ: Vết bẩn đơn giản. Các giao thức hiện tại trong vi sinh, (SUPPL. 15), 1–5.
- Pommerville, J. (2013). Các nguyên tắc cơ bản của Phòng thí nghiệm vi sinh của Alcamo ( thứ 10 ). Jones & Bartlett Học hỏi.
- Prescott, H. (2002). Phòng thí nghiệm Bài tập ở Vi sinh vật (5 ngày ). Các công ty McGraw-Hill.
- Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Nguyên lý vi sinh (1 st ). Tata McGraw-Hill Giáo dục.